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??箍娎展芗に?AMH) ELISA試劑盒在它的研究、生產(chǎn)及使用中常常會碰到非特異性問題,子科生物技術(shù)部根據(jù)多年研發(fā)和臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)如下:
1、試劑盒特異性因素
1)固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板zui為常見[1]。它具有良好的吸附性能,孔底透明度高,空白值低,各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各產(chǎn)品的質(zhì)量差異很大。因此,在選擇試劑盒同時(shí)要對其使用的微孔板型號進(jìn)行認(rèn)證,評估。
2)包被物的純度。在酶聯(lián)免疫測定尤其是間接ELISA中,試劑的特異性取決于使用抗原的純度。目前由于技術(shù)條件的限制,包被用抗原或抗體的純度不可能達(dá)到100%,所以有些非特異性顯色不可避免,只能盡可能提高純度,提高特異性。目前使用的包被抗原一般為合成多肽抗原。
3)包被抗體的效價(jià)。具有高親和力和高特異性的包被抗體,是決定試劑特異性的重要方面。
4 )封閉。是ELISA中重要的一步,目的是封閉固相載體表面尚未被所占據(jù)的空隙[2],減少后續(xù)步驟中非特異性蛋白的干擾。
牛抗繆勒管激素(AMH) ELISA試劑盒
2、操作過程中的問題造成假陽性
1)加樣
對于間接ELISA標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋,如果加樣不準(zhǔn)就會造成誤差,尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時(shí),很小的誤差,會導(dǎo)致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標(biāo)本呈陽性(或陰性)。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本,可較好地避免以上誤差。
2)洗滌
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步,應(yīng)引起操作者重視。無論是手工操作還是機(jī)器操作,得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān),ELISA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
3) 溫育
每種試劑都有其佳反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。
4)酶標(biāo)儀判讀
作為記錄測定結(jié)果的儀器,酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。首先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進(jìn)行保養(yǎng),對濾光片要定期校正;其次酶標(biāo)儀波長設(shè)置要正確,使用雙波長,一個(gè)檢測波長,一個(gè)參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時(shí)先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標(biāo)儀性能有所不同。
??箍娎展芗に?AMH) ELISA試劑盒組成:??箍娎展芗に?AMH) ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下: 14375-45-2 ABA(Abscisic Acid) 脫落酸 >98% 25 mg
14375-45-2 ABA(Abscisic Acid) 脫落酸 >98% 100 mg
14375-45-2 ABA(Abscisic Acid) 脫落酸 >98% 500 mg
7365-82-4 ACES N-(2-乙酰胺基)-2-氨基乙磺酸 >99% 100 g
7365-82-4 ACES N-(2-乙酰胺基)-2-氨基乙磺酸 >99% 250 g
0520461980 60-35-5 Acetamide 乙酰胺 100 g
60-35-5 Acetamide 乙酰胺 500 g
26239-55-4 N-[2-Acetamido]-2-Iminodiacetic Acid N-(2-乙酰氨基)-2-亞氨基二乙酸 99.60% 250 g
64-19-7 Acetic Acid Glacial ACS 乙酸 100 ml
64-19-7 Acetic Acid Glacial ACS 乙酸 99.70% 500 ml
64-19-7 Acetic Acid Glacial 乙酸 99.90% 6x500 ml
102029-52-7 Acetoacetyl Coenzyme A 乙酰乙酰輔酶A鈉鹽 90-95% 1 mg
102029-52-7 Acetoacetyl Coenzyme A 乙酰乙酰輔酶A鈉鹽 90-95% 10 mg
102029-52-7 Acetoacetyl Coenzyme A 乙酰乙酰輔酶A鈉鹽 90-95% 25 mg
102029-52-7 Acetoacetyl Coenzyme A 乙酰乙酰輔酶A鈉鹽 90-95% 50 mg
0520540080 77-76-9 Acetone Dimethyl Acetal 2,2-二甲氧基丙烷 100 g
0521538001 2478-38-8 Acetosyringone 3',5'-二甲氧基-4'-羥基苯乙酮 99.90% 1 g
75-36-5 Acetyl Chloride 乙酰氯 >99% 25 ml
75-36-5 Acetyl Chloride 乙酰氯 >99% 50 ml
75-36-5 Acetyl Chloride 乙酰氯 >99% 250 ml
75520-41-1 Acetyl Coenzyme A Trilithium Salt 乙酰輔酶A,三鋰鹽 92-95% 1 mg
75520-41-1 Acetyl Coenzyme A Trilithium Salt 乙酰輔酶A,三鋰鹽 92-95% 5 mg
75520-41-1 Acetyl Coenzyme A Trilithium Salt 乙酰輔酶A,三鋰鹽 92-95% 10 mg
75520-41-1 Acetyl Coenzyme A Trilithium Salt 乙酰輔酶A,三鋰鹽 92-95% 25 mg
75520-41-1 Acetyl Coenzyme A Trilithium Salt 乙酰輔酶A,三鋰鹽 92-95% 100 mg
0521242510 87-32-1 DL-Acetyl Tryptophan N-乙酰-DL-色氨酸 10 g
7512-17-6 | N-Acetyl-A-D-Glucosamine N-乙酰基-D-葡糖胺 100% 25 g
60-31-1 Acetylcholine Chloride 氯化乙酰膽堿 99% 25 g
1115-47-5 N-Acetyl-DL-Methionine N-乙酰-DL-蛋氨酸 100 g
0520638283 1115-47-5 N-Acetyl-DL-Methionine N-乙酰-DL-蛋氨酸 250 g
87-32-1 N-Acetyl-DL-Tryptophan N-乙酰-DL-色氨酸 99% 25 g
87-32-1 N-Acetyl-DL-Tryptophan N-乙酰-DL-色氨酸 99% 100 g
87-32-1 N-Acetyl-DL-Tryptophan N-乙酰-DL-色氨酸 99% 1 kg
543-24-8 N-Acetylglycine N-乙酰甘氨酸 >98% 100 g
543-24-8 N-Acetylglycine N-乙酰甘氨酸 >98% 1 kg
2466-76-4 N-Acetylimidazole 1-乙?;溥?nbsp; 100.50% 5 g
2466-76-4 N-Acetylimidazole 1-乙酰基咪唑 100.50% 25 g
616-91-1 N-Acetyl-L-Cysteine N-乙酰-L-半胱氨酸 >96% 25 g
616-91-1 N-Acetyl-L-Cysteine N-乙酰-L-半胱氨酸 >96% 50 g
616-91-1 N-Acetyl-L-Cysteine N-乙酰-L-半胱氨酸 >96% 100 g
616-91-1 N-Acetyl-L-Cysteine N-乙酰-L-半胱氨酸 >96% 500 g
616-91-1 N-Acetyl-L-Cysteine N-乙酰-L-半胱氨酸 >96% 1 kg