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人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒檢測(cè)說(shuō)明

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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-12-13 14:57:19瀏覽次數(shù):142次

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英文名稱(chēng) Human AIF (Apoptosis Inducing Factor) ELISA Kit
中文名稱(chēng) 人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
種屬 Human/人
規(guī)格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
檢測(cè)方法 雙抗體夾心法
檢測(cè)范圍 25pg/ml-600pg/ml

靈敏度 2.5pg/ml

產(chǎn)品名稱(chēng):人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒檢測(cè)說(shuō)明

產(chǎn)品編號(hào):BYS10224B

產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T

產(chǎn)品使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中AIF的含量。 

實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)水平。用純化的人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凋亡誘導(dǎo)因子(AIF),再與HRP 標(biāo)記的凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)濃度。

標(biāo)本要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞:檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

6. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

7. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

8.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

 

 

     人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒檢測(cè)說(shuō)明

包裝規(guī)格:48T/96T

有效期:6個(gè)月

預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中相關(guān)物質(zhì)含量。

1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。

2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不*之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

試劑盒的組成:

中文名稱(chēng)English name96T/48T 含量保存
ELISA酶標(biāo)板(可拆卸)Microelisa stripplate8×12 / 8×6 *2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)品Standard1瓶 0.5ml *2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液Standard diluent1 瓶 1.5ml *2-8℃
酶標(biāo)試劑HRP-Conjugate reagent1 瓶 6 ml/3ml *2-8℃
樣品稀釋液Sample diluent1 瓶 6 ml/3ml *2-8℃
顯色劑 A 液Chromogen Solution A1 瓶 6 ml/3ml *2-8℃
顯色劑 B 液Chromogen Solution B1 瓶 6 ml/3ml *2-8℃
終止液Stop Solution1 瓶 6 ml/3ml *2-8℃
濃縮洗滌液wash solution1 瓶 200ml * 
說(shuō)明書(shū)Instruction1份 * 
封板膜Closure plate membrane2 片 * 
密封袋Sealed bags1個(gè) *
 

 

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