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閱讀:592發(fā)布時(shí)間:2017-9-19
如何縮小ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)誤差
ELISA試劑盒查驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。
能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和剖析疑問的才華,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善處理。
怎么減小ELISA實(shí)驗(yàn)中的過失呢?要從天然要素(試劑安穩(wěn)性、準(zhǔn)確率、儀器精密度)和人為要素(操作者)兩個(gè)方面下手:
運(yùn)用校對(duì)過的微量移液器,打掃天然過失。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量查看尤為首要。
值得改進(jìn)的本地,重復(fù)實(shí)驗(yàn)判定樹立后才華改進(jìn),比如洗板次數(shù)的掌握等。
加樣要準(zhǔn)確、迅速?;瘜W(xué)理論標(biāo)明,生成物的量與反應(yīng)物的量成正有關(guān)。
評(píng)估試劑的實(shí)用性。
試劑的安穩(wěn)與否,對(duì)準(zhǔn)確率的凹凸到頭首要。
在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品重復(fù)比照實(shí)驗(yàn),判定試劑符合懇求后方可運(yùn)用。
操作前仔細(xì)閱讀說明書。
嚴(yán)厲按照說明書懇求進(jìn)行規(guī)范化操作。
ELISA試劑盒不一樣批號(hào)的試劑不可混用。
加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能判定,直接影響顯色效果。
顯色的深淺及A值的測(cè)定與參與顯色劑和中止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。
懇求在一定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),如果加樣緩慢,便出現(xiàn)過失,而且試劑長(zhǎng)時(shí)間顯露在外,特別室溫過高時(shí),保存期會(huì)縮短甚至失效。
顯色時(shí)間過短,參與中止液反應(yīng)中止后,底物聯(lián)絡(luò)物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。
超越顯色懇求時(shí)間后顯色,應(yīng)判為假陽性,這或許與試劑自身有關(guān)。
洗板不*,酶聯(lián)絡(luò)物本底顯色會(huì)出現(xiàn)假陽性。
洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗刷液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許出現(xiàn)假陽性。
嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間。
反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng),酶失活;反應(yīng)時(shí)間過短,酶聯(lián)絡(luò)物不能與血清中的微生物抗原抗體充分聯(lián)絡(luò),生成物構(gòu)造懈怠不健壯,簡(jiǎn)略洗掉,都或許構(gòu)成假陰性。
嚴(yán)厲掌握顯色時(shí)間。
加顯色劑后當(dāng)即顯色,不可報(bào)陽性,這或許是本底顯色的效果。
ELISA試劑盒留心試劑保存期,過保存期的試劑不能運(yùn)用。
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