細(xì)胞名稱：SUP-B15 人Ph+急淋白血病細(xì)胞系
組織來源：骨髓；急性淋巴母細(xì)胞白血??；B淋巴母細(xì)胞
培養(yǎng)條件：IMDM +20% FBS
形 態(tài)：懸??；淋巴母細(xì)胞
背 景：這株細(xì)胞來源于一位B細(xì)胞全部為費(fèi)城染色體陽(yáng)性的8歲小孩的骨髓。這些細(xì)胞表達(dá)多個(gè)B細(xì)胞標(biāo)記，但不表達(dá)T細(xì)胞標(biāo)記。β-2 微球蛋白，Leu12，My7 (CD13), OKT9 (CD71), OKT10 (CD38) 及 CALLA (CD10)抗體陽(yáng)性。CB1, Leu 1 (CD5), Leu2 (CD8), Leu3 (CD4), Leu4 (CD3), Leu5 (CD2), Leu6 (CD1a), Leu9, Leu M1 (CD15), My9 (CD33), 表面抗原 (sIg -) 及 Epstein-Barr 病毒陰性。
SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增3～6次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個(gè)階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)／100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力時(shí)期，稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期)，適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。
formazan結(jié)晶的生成量?jī)H與活SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)數(shù)目成正比（死細(xì)胞中琥珀酸脫氫酶消失，不能將MTT還原）。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶標(biāo)儀測(cè)定490 nm處的光密度OD值，以反映出活細(xì)胞數(shù)目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時(shí)都需要避光，用鋁箔紙包好就可以。實(shí)驗(yàn)的時(shí)候一般關(guān)閉超凈臺(tái)上的日光燈來避光，覺得這樣比較好。
1.接種：用含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個(gè)細(xì)胞懸液，以每孔1000－10000個(gè)接種到96孔板，每孔體積200ul.
2.SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)培養(yǎng)：同一般培養(yǎng)條件，培養(yǎng)3－5天（可根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時(shí)間）。
3.呈色：培養(yǎng)3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.
繼續(xù)孵育4小時(shí)，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，對(duì)于懸浮需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結(jié)晶物充分融解。
4.比色：選擇490nm波長(zhǎng)，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測(cè)儀上測(cè)定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)生長(zhǎng)曲線。
KP-N-NS人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移)
KU812人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞
KURAMOCHI人卵巢癌細(xì)胞
kyse-140人食管癌細(xì)胞
Kyse450人食管癌細(xì)胞
KYSE-510人食管癌細(xì)胞
L78人肺腺鱗癌細(xì)胞
LAX人肺腺癌
LECPα-1人肺癌細(xì)胞
Li-7人肝癌細(xì)胞
lncap人前列腺癌細(xì)胞
LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞
LoVo人結(jié)腸癌細(xì)胞
會(huì)員1.png)
