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上海澤葉生物科技有限公司


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293T/17(人胚腎細胞)

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式:宛雙鳳查看聯(lián)系方式

更新時間:2016-11-28 10:58:56瀏覽次數(shù):317次

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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:2985條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:宛雙鳳 (銷售經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

293T/17(人胚腎細胞)描述:(1)所有細胞株購自ATCC;
(2) 公司可提供新鮮或凍存細胞株;
(3) 細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;
(4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

詳細介紹

細胞名稱:293T/17    人胚腎細胞

組織來源:

培養(yǎng)條件:DMEM +10% FBS

形       態(tài):貼壁;上皮細胞樣

背       景:293T/17細胞株是293T (293tsA1609neo)細胞株的衍生株。 293T 是293細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細胞進行克隆,檢測pBND和pZAP載體,得到一株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株,293T/17。細胞持續(xù)表達SV40 大T抗原,而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號克隆。

293T/17(人胚腎細胞)“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%。接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。

formazan結(jié)晶的生成量僅與活293T/17(人胚腎細胞)數(shù)目成正比(死細胞中琥珀酸脫氫酶消失,不能將MTT還原)。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉(pH 4.7)的MTT溶解液中溶解,利用酶標儀測定490 nm處的光密度OD值,以反映出活細胞數(shù)目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光,用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關閉超凈臺上的日光燈來避光,覺得這樣比較好。

1.接種:用含10%胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個細胞懸液,以每孔1000-10000個接種到96孔板,每孔體積200ul.

2.293T/17(人胚腎細胞)培養(yǎng):同一般培養(yǎng)條件,培養(yǎng)3-5天(可根據(jù)試驗目的和要求決定培養(yǎng)時間)。

3.呈色:培養(yǎng)3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul.

繼續(xù)孵育4小時,終止培養(yǎng),小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液,對于懸浮需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO,振蕩10分鐘,使結(jié)晶物充分融解。

4.比色:選擇490nm波長,在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值,記錄結(jié)果,以時間為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制293T/17(人胚腎細胞)生長曲線。

KP-N-NS人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移)

KU812人外周血嗜堿性白血病細胞

KURAMOCHI人卵巢癌細胞

kyse-140人食管癌細胞

Kyse450人食管癌細胞

KYSE-510人食管癌細胞

L78人肺腺鱗癌細胞

LAX人肺腺癌

LECPα-1人肺癌細胞

Li-7人肝癌細胞

lncap人前列腺癌細胞

LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞

LoVo人結(jié)腸癌細胞

 

關鍵詞:酶標儀

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