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上海澤葉生物科技有限公司


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RAW 264.7（小鼠單核巨噬細胞白血病細胞）

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式：宛雙鳳查看聯(lián)系方式

更新時間：2016-11-28 14:14:55瀏覽次數(shù)：305次

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經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品：2985條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：宛雙鳳 （銷售經(jīng)理）

產(chǎn)品簡介

RAW 264.7（小鼠單核巨噬細胞白血病細胞）的處理方法：
1. 先從外包裝盒拿出離心管，在離心管表面噴一層酒精，并小心去掉封口膜；
2. 將離心管中的細胞在超凈工作臺內(nèi)取出一部分進行細胞計數(shù)（詳見細胞凍存）。
3. 如細胞密度小于3×106/ml，可直接將離心管中的細胞轉(zhuǎn)移到T25瓶中，置于37°C，5% CO2的培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

詳細介紹

細胞名稱：RAW 264.7    小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

組織來源：Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；單核細胞；巨噬細胞

培養(yǎng)條件：DMEM +10% FBS

形       態(tài)：貼壁；不規(guī)則圓形

背       景：此細胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤。 sIg-, Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性。 可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。 可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。 LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分解紅血球但對腫瘤靶細胞無作用

RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)／100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可達3～5％。接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。

formazan結(jié)晶的生成量僅與活RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)數(shù)目成正比（死細胞中琥珀酸脫氫酶消失，不能將MTT還原）。還原生成的formazan結(jié)晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉（pH 4.7）的MTT溶解液中溶解，利用酶標儀測定490 nm處的光密度OD值，以反映出活細胞數(shù)目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光，用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關(guān)閉超凈臺上的日光燈來避光，覺得這樣比較好。

1.接種：用含10％胎小牛血清得培養(yǎng)液配成單個細胞懸液，以每孔1000－10000個接種到96孔板，每孔體積200ul.

2.RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)培養(yǎng)：同一般培養(yǎng)條件，培養(yǎng)3－5天（可根據(jù)試驗?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時間）。

3.呈色：培養(yǎng)3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS 配)20ul.

繼續(xù)孵育4小時，終止培養(yǎng)，小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液，對于懸浮需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO，振蕩10分鐘，使結(jié)晶物充分融解。

4.比色：選擇490nm波長，在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值，記錄結(jié)果，以時間為橫坐標，吸光值為縱坐標繪制RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞白血病細胞)生長曲線。

關(guān)鍵詞：酶標儀

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