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上海研盟生物科技有限公司
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產(chǎn)品型號
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-11-13 11:56:08瀏覽次數(shù):233次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線上海研盟生物提供美國ATCC傳代細(xì)胞株“B95-8細(xì)胞,絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞",進(jìn)口來源,國內(nèi)保種,活性保證,咨詢:.
【友情提示】:產(chǎn)品價(jià)格與說明書請?zhí)砑涌头騺黼娫儍r(jià),索要說明書;
產(chǎn)品名稱:B95-8細(xì)胞,絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞
基本特性:
C細(xì)胞數(shù)量:1000000個(gè)細(xì)胞數(shù)
E細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
凍存和復(fù)蘇原則就是:慢凍、快解凍。因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)主要成分還是水,在-20℃時(shí)細(xì)胞中的水結(jié)成冰晶,而與水相比,冰的密度小而體積大,會造成細(xì)胞器膜、細(xì)胞膜的損傷,這樣很容易導(dǎo)致細(xì)胞復(fù)蘇失敗。
細(xì)胞名稱:B95-8,EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細(xì)胞
組織來源:外周血淋巴細(xì)胞
培養(yǎng)條件:RPMI-1640+10% FBS
形態(tài):懸浮;淋巴母細(xì)胞
背 景:B95-8細(xì)胞株源自暴露于人白血球中抽提的EB病毒的絨猴白血球。B95-8是一個(gè)連續(xù)株并釋放高滴度的轉(zhuǎn)染EB病毒。 此細(xì)胞株提供EB病毒用于建立人的連續(xù)淋巴細(xì)胞株。
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性:所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。
B95-8細(xì)胞,絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞技術(shù)相關(guān)問答:
1. 如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始。
2. 何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定, 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。
3. 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4. 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生*的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后,用80%酒精再固定2h(-20℃)。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液,搖床上洗滌5min,三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分,按50μl/cm2滴加反應(yīng)液(每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL),使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上,蓋上塑料蓋玻片,置濕盒中,37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片,將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi),洗滌兩次,每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分,按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液(含FITC 2.5μg/mL),室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi),洗兩次,每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi),室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上,亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣,置暗盒中,盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 7-10個(gè)工作日 |
,體內(nèi)、外細(xì)胞的差異和分化:
1、差異:細(xì)胞離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,生活在缺乏動態(tài)平衡相對穩(wěn)定環(huán)境,日久天長,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無限生長的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實(shí)際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后,這種差異就開始發(fā)生了。
2、分化:體外培養(yǎng)的細(xì)胞分化能力并未*喪失,只是環(huán)境的改變,細(xì)胞分化的表現(xiàn)和在體內(nèi)不同。細(xì)胞是否表現(xiàn)分化,關(guān)鍵在于是否存在使細(xì)胞分化的條件,如Friend細(xì)胞(小鼠紅白血病細(xì)胞)在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白,血管內(nèi)皮細(xì)胞在類似基膜物質(zhì)底物上培養(yǎng)時(shí)能長成血管狀結(jié)構(gòu),雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異的單克隆抗體,這些均屬于細(xì)胞分化行為。
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人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,LS 174T
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,NCI-H716
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,SK-CO-1
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人食管癌細(xì)胞,TE-11
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