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CRFK細(xì)胞,貓腎細(xì)胞

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細(xì)胞

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上海研盟生物科技有限公司

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產(chǎn)品簡介

上海研盟生物提供美國ATCC傳代細(xì)胞株“CRFK細(xì)胞,貓腎細(xì)胞"，進(jìn)口來源，國內(nèi)保種，活性保證，咨詢：.

詳細(xì)介紹

【友情提示】：產(chǎn)品價(jià)格與說明書請(qǐng)?zhí)砑涌头騺黼娫儍r(jià)，索要說明書；

注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們。

2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

產(chǎn)品名稱：CRFK細(xì)胞,貓腎細(xì)胞

基本特性：
C細(xì)胞數(shù)量：1000000個(gè)細(xì)胞數(shù)
E細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

凍存和復(fù)蘇原則就是：慢凍、快解凍。因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)主要成分還是水，在-20℃時(shí)細(xì)胞中的水結(jié)成冰晶，而與水相比，冰的密度小而體積大，會(huì)造成細(xì)胞器膜、細(xì)胞膜的損傷，這樣很容易導(dǎo)致細(xì)胞復(fù)蘇失敗。

細(xì)胞名稱：CRFK細(xì)胞,貓腎細(xì)胞

細(xì)胞特性
組織來源：正常腎，皮層
培養(yǎng)條件：RPMI-1640 +10% FBS
形態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣
含量：>1x10的6次方個(gè)/mL
污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?br />
細(xì)胞用途：僅供科研使用。

復(fù)蘇方法

1．從液氮罐中取出安剖；有時(shí)因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。

2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng)，盡快解凍。

3．剪開紗布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，凈化臺(tái)上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。

4．低速離心（500～1000轉(zhuǎn)/分）5分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。

5．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。

細(xì)胞分裂間期分有3階段

細(xì)胞從上一次分裂結(jié)束后到下一次分裂開始的一段時(shí)間成為分裂間期。分裂間期以細(xì)胞內(nèi)部DNA合成為依據(jù)，又可分為：

1.G1期——DNA合成前期該期是從上一次細(xì)胞周期完成后開始的，剛形成的兩個(gè)子細(xì)胞，其體積較原有的細(xì)胞小。該期特點(diǎn)是物質(zhì)代謝活躍，迅速合成RNA和蛋白質(zhì)，細(xì)胞體積顯著增大。這一期的主要意義在于為下階段S期的DNA復(fù)制作好物質(zhì)和能量的準(zhǔn)備。

細(xì)胞進(jìn)入G1期后，并不是毫無例外地都進(jìn)入下一期繼續(xù)增殖，在此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)三種不同前景的細(xì)胞：①增殖細(xì)胞：這種細(xì)胞能及時(shí)從G1期進(jìn)入S期，并保持旺盛的分裂能力。例如消化道上皮細(xì)胞及骨髓細(xì)胞等； ②暫不增殖細(xì)胞或休止細(xì)胞：細(xì)胞進(jìn)入G1期后不立即轉(zhuǎn)入S期，在需要時(shí)，如損傷、手術(shù)等，才進(jìn)入S期繼續(xù)增殖。例如肝細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞等；③不增殖細(xì)胞：此種細(xì)胞進(jìn)入G1期后，失去分裂能力，終身處于G1期，zui后通過分化、衰老直至死亡。例如高度分化的神經(jīng)細(xì)胞、肌細(xì)胞及成熟的紅細(xì)胞等。

2.S期——DNA合成期 S期主要特征是復(fù)制DNA，使DNA含量增加一倍，保證將來分裂時(shí)兩個(gè)子細(xì)胞的DNA含量不變。從G1期進(jìn)入S期是細(xì)胞周期的關(guān)鍵時(shí)刻，只要DNA的復(fù)制一開始，細(xì)胞增殖活動(dòng)就會(huì)進(jìn)行下去，直到分裂成兩個(gè)子細(xì)胞為止。該期中，如果受到某些因素干擾，會(huì)影響到DNA的復(fù)制，而引起\細(xì)胞的變異或分裂異常終止。

3.G2期——DNA合成后期此期主要為分裂期做準(zhǔn)備。這一期DNA合成終止，但合成少量RNA和蛋白質(zhì)，可能與構(gòu)成紡錘體的微管蛋白有關(guān)

來源有保障（世界*品牌），狀態(tài)且傳代次數(shù)好，經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。每管含有細(xì)胞數(shù)>1000000個(gè)，具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn)，純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運(yùn)輸方式：活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks）。
細(xì)胞純度：95%。
細(xì)胞來源：ATCC等。
包裝：內(nèi)層無菌自封袋，防壓泡沫盒，外層防壓保溫氣泡袋，說明書。

用途：本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用，不可應(yīng)用于治療等其他方面。

細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存.

，體內(nèi)、外細(xì)胞的差異和分化：

1、差異：細(xì)胞離體后，失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響，生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境，日久天長，易發(fā)生如下變化：分化現(xiàn)象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡；或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性，變成可無限生長的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此，培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體，它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能，也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實(shí)際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后，這種差異就開始發(fā)生了。

2、分化：體外培養(yǎng)的細(xì)胞分化能力并未*喪失，只是環(huán)境的改變，細(xì)胞分化的表現(xiàn)和在體內(nèi)不同。細(xì)胞是否表現(xiàn)分化,關(guān)鍵在于是否存在使細(xì)胞分化的條件，如Friend細(xì)胞（小鼠紅白血病細(xì)胞）在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白，血管內(nèi)皮細(xì)胞在類似基膜物質(zhì)底物上培養(yǎng)時(shí)能長成血管狀結(jié)構(gòu)，雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異的單克隆抗體，這些均屬于細(xì)胞分化行為。

本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM，GIBCO，貨號(hào)11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。

傳代時(shí)間：2-3天 3-5天

傳代比例：1:2~1:3 1:1~1:2

細(xì)胞活力：95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性：所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。

研盟生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品：

人永生化淋巴細(xì)胞，CNLMG-B5537LC
人類成纖維細(xì)胞，CNLMG-B5537SKIN
人淋巴細(xì)胞，1301
人B淋巴細(xì)胞，WIL2-S
人外周血B淋巴細(xì)胞，IM-9
人淋巴瘤細(xì)胞，Romas
人伯基特淋巴瘤細(xì)胞，EB-3
人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞，U937
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞，HLCL 21B8
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞，HLCL 14C1
人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞，HLCL 9B10

35.1細(xì)胞，小鼠雜交瘤細(xì)胞抗CD2 35.1細(xì)胞
293細(xì)胞，胚腎細(xì)胞 293細(xì)胞
5637細(xì)胞，膀胱癌細(xì)胞 5637細(xì)胞
22RV1 細(xì)胞，前列腺癌細(xì)胞 22RV1 細(xì)胞
293 Cells, low passage 細(xì)胞，胚腎細(xì)胞 293 Cells low passage 細(xì)胞
293T 細(xì)胞，胚腎細(xì)胞 293T 細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞，胚腎細(xì)胞 2V6.11細(xì)胞
3T3-L1 細(xì)胞，小鼠脂肪細(xì)胞 3T3-L1 細(xì)胞
3T3-Swiss albino 細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-Swiss albino 細(xì)胞
3T6-Swiss albino 細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T6-Swiss albino 細(xì)胞
4T1細(xì)胞，小鼠乳xian癌細(xì)胞 4T1細(xì)胞
6T-CEM 細(xì)胞， T 細(xì)胞白血病細(xì)胞 6T-CEM 細(xì)胞
786-O [786-0] 細(xì)胞，腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 786-O [786-0] 細(xì)胞
95-D 細(xì)胞，高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 95-D 細(xì)胞
A172 細(xì)胞，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172 細(xì)胞
A3 細(xì)胞， T 淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 A3 細(xì)胞