污水處理設(shè)備 污泥處理設(shè)備 水處理過濾器 軟化水設(shè)備/除鹽設(shè)備 純凈水設(shè)備 消毒設(shè)備|加藥設(shè)備 供水/儲(chǔ)水/集水/排水/輔助 水處理膜 過濾器濾芯 水處理濾料 水處理劑 水處理填料 其它水處理設(shè)備
上海研盟生物科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-11-03 10:28:50瀏覽次數(shù):509次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線上海研盟生物提供美國ATCC傳代細(xì)胞株“Hs 578Bst細(xì)胞研盟供應(yīng)",進(jìn)口來源,國內(nèi)保種,活性保證,咨詢:.
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產(chǎn)品名稱:Hs 578Bst細(xì)胞研盟供應(yīng)
細(xì)胞特性
產(chǎn)品運(yùn)輸:免費(fèi)快遞
保存條件:低溫下
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品應(yīng)用:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究
細(xì)胞是一個(gè)獨(dú)立有序的、能夠進(jìn)行自我調(diào)控的結(jié)構(gòu)與功能體系。每一個(gè)細(xì)胞都具有一整套完整的裝置以滿足自身代謝的需要。單細(xì)胞生物能夠獨(dú)立地進(jìn)行全部的生命活動(dòng)。在多細(xì)胞生物中,盡管每一個(gè)細(xì)胞的功能受到整體的協(xié)調(diào)與控制,但每一個(gè)細(xì)胞都是一個(gè)獨(dú)立的、自我控制的、高度有序的代謝系統(tǒng),有相對(duì)獨(dú)立的生命活動(dòng),各種組織都是以細(xì)胞為基本單位來執(zhí)行特定的功能,整個(gè)機(jī)體的新陳代謝活動(dòng)都是以細(xì)胞為單位協(xié)調(diào)地進(jìn)行的。
只要具備合適的生存條件,每一個(gè)分離的細(xì)胞都可以在體外生長(zhǎng)繁殖,表現(xiàn)出生命的特征。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對(duì)營養(yǎng)成分、促生長(zhǎng)因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。
含量:>1x10的6次方 個(gè)/mL
污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
基本特性:
描述:(1)所有細(xì)胞株購自ATCC;
(2) 公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;
(3) 細(xì)胞株數(shù)量約 1000000個(gè)/瓶;
(4) 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí),則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代,提供復(fù)蘇好的細(xì)胞株,貼壁及懸浮細(xì)胞形式,細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿、光澤度好,*,并提供細(xì)胞報(bào)價(jià)、所需培養(yǎng)基、種屬來源、組織來源、形態(tài)、背景資料等。
細(xì)胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點(diǎn):
1. 實(shí)驗(yàn)開始前,無菌室和無菌操作臺(tái)需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%ethanol擦拭無菌操作臺(tái)面,并且打開無菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)行10分鐘之后,才可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只能處理一株細(xì)胞株,即使培養(yǎng)基*相同也不可共用培養(yǎng)基,以避免細(xì)胞間污染或失誤混淆。實(shí)驗(yàn)完成后,請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)物品拿出工作臺(tái),用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺(tái)面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺(tái)運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后,才能進(jìn)行下一個(gè)細(xì)胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時(shí)放置,其它實(shí)驗(yàn)用品使用完畢后應(yīng)移出,有利于空氣流通。實(shí)驗(yàn)用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)在臺(tái)面的*無菌區(qū)域內(nèi)完成,請(qǐng)勿在邊緣非無菌區(qū)域進(jìn)行操作。
3. 小心取用無菌實(shí)驗(yàn)物品,避免細(xì)菌污染。請(qǐng)勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進(jìn)行操作。容器打開后,請(qǐng)用手夾住瓶蓋并輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全,必須穿戴齊實(shí)驗(yàn)衣和實(shí)驗(yàn)手套后才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)于病毒感染或是來自人類的細(xì)胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃?jí)的無菌操作臺(tái)進(jìn)行(至少是Class II)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測(cè)下列項(xiàng)目:
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染(水盤的水需用無菌水,每周定時(shí)更換)。
5.3. 無菌操作臺(tái)內(nèi)的airflow壓力,定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜,預(yù)濾網(wǎng)(300小時(shí)/預(yù)濾網(wǎng),3000小時(shí)/HEPA)。
6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑(Zephrin 1:750),需定期更換水槽中的水。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
Hs 578Bst細(xì)胞研盟供應(yīng)復(fù)蘇方法
1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。
3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。
4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。
5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。
我公司認(rèn)為購買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn),客戶收到細(xì)胞,原瓶里的培養(yǎng)液可以收集繼續(xù)使用,在*次消化傳瓶時(shí),我們要求客戶留一瓶細(xì)胞繼續(xù)使用我們的培養(yǎng)液,其它瓶的細(xì)胞客戶可使用自己的培養(yǎng)液,這樣可減少由于細(xì)胞不適應(yīng)培養(yǎng)液導(dǎo)致的細(xì)胞問題。
來源有保障(世界*品牌),狀態(tài)且傳代次數(shù)好,經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。每管含有細(xì)胞數(shù)>1000000個(gè),具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn),純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運(yùn)輸方式:活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)。
細(xì)胞純度:95%。
細(xì)胞來源:ATCC等。
包裝:內(nèi)層無菌自封袋,防壓泡沫盒,外層防壓保溫氣泡袋,說明書。
用途:本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用,不可應(yīng)用于治療等其他方面。
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存.
,注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBCO,貨號(hào)11965-092),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,zui后的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心,用血清重懸浮,加DMSO至zui終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性:所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
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