背景介紹:Receptor tyrosine kinases (RTKs) play a key role in the communication of cells with their microenvironment. These molecules are involved in the regulation of cell growth, differentiation and metabolism. The protein encoded by this gene is a RTK that is widely expressed in normal and transformed epithelial cells and is activated by various types of collagen. This protein belongs to a subfamily of tyrosine kinase receptors with a homology region to the Dictyosium discoideum protein discoidin I in their extracellular domain. Its autophosphorylation is achieved by all collagens so far tested (type I to type VI). In situ studies and Northern-blot analysis showed that expression of this encoded protein is restricted to epithelial cells, particularly in the kidney, lung, gastrointestinal tract, and brain. In addition, this protein is significantly over-expressed in several human tumors from breast, ovarian, esophageal, and pediatric brain. This gene is located on chromosome 6p21.3 in proximity to several HLA class I genes. Alternative splicing of this gene results in multiple transcript variants.
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神經(jīng)上皮*激酶抗體,Anti-MCK10抗體-上海研盟生物有限公司優(yōu)質(zhì)*產(chǎn)品。我公司銷售國內(nèi)外科研產(chǎn)品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標(biāo)記抗體,Elisa酶聯(lián)免疫試劑盒,放免試劑盒,培養(yǎng)基,各種動(dòng)物血清等產(chǎn)品,歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。
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中文名稱:神經(jīng)上皮*激酶抗體
英文名稱:Anti-MCK10 antibody
規(guī)格:0.1ml/0.2m
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產(chǎn)品類型:一抗
神經(jīng)上皮*激酶抗體,Anti-MCK10抗體簡單介紹:
別 名:MCK10; CAK; CD 167; CD167; CD167a; DDR1; Cell adhesion kinase; DDR 1; DDR; DDR1; Discoidin domain receptor; Discoidin receptor tyrosine kinase isoform a; EDDR 1; Epithelial discoidin domain receptor 1; Epithelial specific receptor kinase; Mammarian carcinoma kinase 10; Neuroepithelial tyrosine kinase; Neurotrophic tyrosine kinase receptor type 4; NTRK 4; PTK 3; PTK 3A protein tyrosine kinase 3A; Receptor tyrosine kinase NEP; RTK 6; TRK E; Tyrosine kinase receptor E.
合適的抗體稀釋度
抗體的濃度是免疫染色的關(guān)鍵,如果抗體濃度過高,抗體分子過多于抗原決定簇,可導(dǎo)致抗體結(jié)合減少,產(chǎn)生陰性結(jié)果。此陰性結(jié)果并不一定是缺少抗原,而是由于抗體過量,這種現(xiàn)象類似于凝集反應(yīng)中的前帶效應(yīng)(prozone effect)。因此,必須使用一系列稀釋做“棋盤式效價(jià)滴定”,檢測抗體的合適稀釋度,以得到zui大強(qiáng)度的特異性染色和zui弱的背景染色??贵w稀釋度應(yīng)根據(jù):1.抗體效價(jià)高,溶液中特異性抗體濃度越高,工作稀釋度越高;2.一般講,應(yīng)用的抗體稀釋度越大,溫育時(shí)間越長;3.對于抗體與非特異性蛋白的結(jié)合,只有高稀釋度時(shí)才能防止其非特異性背景染色;4.稀釋用緩沖液的種類,標(biāo)本的固定和處理過程等也可影響稀釋度,所以合適的稀釋度應(yīng)根據(jù)具體情況測定??贵w的稀釋主要是指*抗體,因?yàn)?抗體中特異性抗體合適的濃度是關(guān)鍵,應(yīng)用高稀釋度*抗體僅高親和力的特異性染色反應(yīng),減少或消除其中交叉抗體反應(yīng)。
免疫印跡法是一種通過凝膠電泳分離蛋白質(zhì)并通過電轉(zhuǎn)移把蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到吸附膜上。一經(jīng)蛋白印跡后,即可通過特異性的標(biāo)記抗體檢測到相應(yīng)蛋白質(zhì)。
十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)可用于檢測已被SDS化學(xué)變性的蛋白。然而,某些特定的抗體不會(huì)在一個(gè)變性的蛋白質(zhì)分子上識(shí)別其抗原表位,這時(shí)需要進(jìn)行不含SDS的聚丙烯酰胺凝膠電泳。
蛋白印跡轉(zhuǎn)膜可以通過濕法或半干法進(jìn)行。在前者,凝膠夾在印跡膜和各種過濾裝置中間,然后把整個(gè)裝置埋進(jìn)一個(gè)裝滿Tris轉(zhuǎn)移緩沖的電極槽中。在后者,夾在中間的凝膠周圍只有少量的緩沖液,然后封閉在電極板之間。雖然半干法轉(zhuǎn)膜較快,但需要很好地?cái)M合各部分的夾層配件,而濕法轉(zhuǎn)膜很少會(huì)出現(xiàn)問題,可以盡量保持重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的*性。此外,如果半干法轉(zhuǎn)膜時(shí)間過長,較小分子量的蛋白質(zhì)可能會(huì)從膜上轉(zhuǎn)過。
轉(zhuǎn)膜后,需對膜進(jìn)行封閉,以減少非特異性蛋白結(jié)合,然后進(jìn)行用一抗孵育膜,以研究感興趣的目標(biāo)蛋白。單克隆抗體通常具有更高的特異性;然而許多單克隆抗體產(chǎn)生于某個(gè)特定肽段而不是一個(gè)天然蛋白質(zhì),因此可能無法檢測到PAGE所分離的天然蛋白。也可使用多克隆抗體,但易形成較高的背景值。因一抗通常無標(biāo)記,所以需要一個(gè)可以結(jié)合在一抗Fc段的標(biāo)記的二抗,以用于zui后的檢測。通常會(huì)用酶來標(biāo)記二抗。酶標(biāo)記后的印跡可通過化學(xué)發(fā)光酶底物及放射自顯影技術(shù)成像。被抗體檢測和標(biāo)記到的蛋白質(zhì)會(huì)出現(xiàn)在圖像的暗區(qū)。
斑點(diǎn)印跡法類似于免疫印跡法,在膜上檢測目標(biāo)蛋白;但是斑點(diǎn)印跡法中檢測的蛋白質(zhì)不用電泳進(jìn)行分離。取而代之的是,含有目標(biāo)蛋白的樣品被直接“點(diǎn)”到膜上,這不能做到定量檢測,但它可以直接檢測某種特定蛋白的有無。例如,斑點(diǎn)印跡法可用于檢測蔗糖梯度分離的細(xì)胞裂解產(chǎn)物中的某些蛋白質(zhì)定位。
神經(jīng)上皮*激酶抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
免疫熒光雙重染色熒光雙染或多重染色是指將帶有不同熒光素標(biāo)記的抗體孵育在同一張切片上,鏡下觀察時(shí)將不同的顏色組合在一起,將不同的抗原表達(dá)情況一起呈現(xiàn)出來,這樣分析多個(gè)抗原的關(guān)聯(lián)性更客觀、更直接。
熒光雙染也有直接法和間接法。直接法是使用帶有不同熒光素標(biāo)記的兩個(gè)抗體同時(shí)孵育后觀測;間接法需要用到兩個(gè)不同種屬來源的一抗(例如一個(gè)鼠源抗體,一個(gè)兔源抗體),后面要選擇與一抗相對應(yīng)的二抗同時(shí)需要帶有不同的熒光素標(biāo)記(例如FITC標(biāo)記山羊抗小鼠和Cy3標(biāo)記山羊抗兔),間接法需要同時(shí)兼顧一抗和二抗的種屬關(guān)系,避免出現(xiàn)相互的交叉反應(yīng)。
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