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上海廣銳生物科技有限公司

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小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子酶聯(lián)免疫分析法

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所在地上海

更新時(shí)間:2018-12-28 22:25:02瀏覽次數(shù):589次

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小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子酶聯(lián)免疫分析法
試劑盒種屬:豚鼠、兔子、人、小鼠、犬、雞、羊、豬、牛、大鼠、馬、猴、各類植物等種屬標(biāo)本操作簡(jiǎn)單、快速、敏感性高、特異性強(qiáng)、產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、可靠、竭誠(chéng)期待與老師*合作!

小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子酶聯(lián)免疫分析法 實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)水平。用純化的小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)再與HRP標(biāo)記的bFGF抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)濃度。

試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于9%和11%
小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 檢測(cè)范圍:0.5ng/L -30ng/L             
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8保存

標(biāo)準(zhǔn)品:36ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8保存

小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子酶聯(lián)免疫分析法操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為24ng/L,16ng/L ,8ng/L,4ng/L,2ng/L)。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人I型前膠原(PC-I)酶聯(lián)免疫分析法

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