上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進口elisa試劑盒,細胞株,細胞系,菌種 |
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更新時間:2022-08-17 15:35:57瀏覽次數(shù):162
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操作流程:
1待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
2酶標板置4℃,包被過夜。
3洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
5酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
6洗板,同4。
7每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
9洗板,同4。
10每孔加tmb顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
11每孔加100μl 2mol/l h2so4終止反應。
12分別測450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,終測得的od值為兩者之差w1-w2,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13數(shù)據(jù)處理:在得出標本s和陰性對照n的 od值后,計算s/n值。s/n≥2.1為陽性判定標準。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Pig CAMK2B/CAM2/CAMKB 檢測試劑盒 | Pig CAMK2B/CAM2/CAMKB ELISA kit | 48T/96T | BJ-E0224 |
試劑盒組成及試劑配制:
1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,已獲得國家承認的“三證",每一個產(chǎn)品都有對應的批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解。
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法"(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
Op香豆?;登G素 HPLC≥98% 10mg MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA試劑盒小鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O乙酰山子烯酮 HPLC≥98% 10mg MousecoagulationfactorⅩ,FⅩELISA試劑盒小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲烯基丁內酯 GC≥95% 20mg Mousecoicoopieleasinghormone,CRHELISA試劑盒小鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
金剛烷醇 HPLC≥98% 20mg MouseCoisolELISA試劑盒小鼠(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
金剛烷酮 HPLC≥98% 20mg MouseCollagenaseIELISA試劑盒小鼠膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙酰基洋苷 HPLC≥98% 10mg MouseCollagenaseTypeIIELISA試劑盒小鼠膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,′二芥子?;崽?/span> HPLC≥98% 20mg MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISA試劑盒小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,二苯甲?;闃侨嗜?/span> HPLC≥98% 10mg MouseCollageypeⅡ,ColⅡELISA試劑盒小鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,',',四甲氧基二苯乙烯 GC≥98% 20mg MouseCollageypeⅣ,ColⅣELISA試劑盒小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,'O二甲基鞣花酸 HPLC≥98% 10mg MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA試劑盒小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格 Toltrazuril 中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tolazoline 中文名:鹽酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tokinolide B 中文名: 分子式:C24H28O4 度:96.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tofacitinib 中文名:托法替尼 分子式:C22H28N6O8 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tiotropium bromide 分子式:C19H22NO4S2 度:98.0%
小鼠胰島素降解酶(IDE)elisa檢測試劑盒
Pig CAMK2B/CAM2/CAMKB 檢測試劑盒人復制蛋白A(RPA-70)elisa檢測試劑盒
人復制蛋白A(RPA-70)elisa分析檢測試劑盒
人附睪蛋白4(HE4)elisa檢測試劑盒免費代測
人附睪蛋白4(HE4)elisa分析檢測試劑盒
人Q10(CoQ10)elisa檢測試劑盒
注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他Elisa試劑盒請咨詢銷售人員。產(chǎn)品僅用于科研