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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進(jìn)口elisa試劑盒，細(xì)胞株，細(xì)胞系，菌種 |
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- 所在地 上海市
更新時(shí)間：2023-03-16 09:58:47瀏覽次數(shù)：178
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中文名稱：pTG-T載體連接試劑盒
英文名稱：pTG-T Vector Ligation Kit
產(chǎn)品規(guī)格：20次|60次
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164745
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒適用于PCR產(chǎn)物的克隆，可將PCR產(chǎn)物連接到pTG-T載體上，便于進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。DNA片段連接是經(jīng)常出問題的步驟，為了提高連接效率，本試劑盒提供了兩種連接Buffer供不同情況選擇：10×Ligation Buffer Ⅰ適合置于16℃連接過夜，可獲得佳連接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ?yàn)榭焖龠B接Buffer，25℃連接10分鐘即可轉(zhuǎn)化，快捷方便。 英文名稱：pTG-T Vector Ligation Kit 產(chǎn)品規(guī)格：20次|60次 本試劑盒適用于PCR產(chǎn)物的克隆，可將PCR產(chǎn)物連接到pTG-T載體上，便于進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。DNA片段連接是經(jīng)常出問題的步驟，為了提高連接效率，本試劑盒提供了兩種連接Buffer供不同情況選擇：10×Ligation Buffer Ⅰ適合置于16℃連接過夜，可獲得佳連接效果；2×Ligation Buffer Ⅱ?yàn)榭焖龠B接Buffer，25℃連接10分鐘即可轉(zhuǎn)化，快捷方便。 pTG-T是一種高效克隆PCR產(chǎn)物的專用載體，它是由一種克隆載體在EcoRV酶切位點(diǎn)處切開，在兩側(cè)的3′端添加T而成。由于大部分耐熱聚合酶反應(yīng)時(shí)都會在PCR產(chǎn)物的3′端添加一個(gè)A，可與pTG-T 3′端的T互補(bǔ)連接，因此可大大提高PCR產(chǎn)物的連接和克隆效率。連接使用的PCR片段3′端應(yīng)帶有A末端，如果是使用pfu等高保真聚合酶擴(kuò)增的不帶A末端的片段，應(yīng)使用平末端連接試劑盒先加A末端后再連接。 帶有插入片段的重組子可根據(jù)α互補(bǔ)原理，進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，判斷載體中有無外源基因的插入（白色克隆為陽性重組克隆，藍(lán)色的為載體自連的克隆，具體篩選原理參考分子克隆等書籍）?？寺『螅墒褂猛ㄓ靡?/span>T7、SP6進(jìn)行測序。 保存條件：-20℃保存，避免反復(fù)凍融（載體和連接試劑可以適當(dāng)?shù)姆盅b成小份，防止反復(fù)凍融，以保證質(zhì)量）。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
動物細(xì)胞周期G2期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
動物細(xì)胞周期M期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
通用型動物細(xì)胞周期（G1/S和G2/M期）同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
植物細(xì)胞周期G0期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
植物細(xì)胞周期G1早期同步（SYNCHRONY）處理試劑盒
小鼠脂聯(lián)素(ADP)elisa ，英文名： ADP ELISA Kit
小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA檢測試劑盒Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
人卷曲螺旋, 肌球蛋白樣BCL2 結(jié)合蛋白/自噬基因Beclin 1(BECN1)免疫試劑盒 Human BECN1 ELISA Kit
Ratadiponectin,ADPELISAKit大鼠脂聯(lián)素(ADP)elisa規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞TNFBETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次
Mouse17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSelisa小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa規(guī)格：96T/48T
pTG-T載體連接試劑盒直接紅素D-BIL試劑盒化學(xué)氧化法 96T 微板法
脂質(zhì)過氧化物LPO含量測試盒 20T 50T 100T 比色法
脂肪組織蛋白提取試劑盒50T
脂肪組織蛋白提取試劑盒100T
脂肪酸合成酶（FAS）測試盒
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
