上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-24 19:54:48瀏覽次數(shù):289
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中文名稱:熒光定量PCR反應(yīng)預(yù)混液(SYBR Green I)
英文名稱:2×ByFast SYBR Green qPCR Mix
產(chǎn)品規(guī)格:1mL|5×1mL|25×1mL
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164382
產(chǎn)品介紹:
本制品是一種用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR,即qPCR(Quantitative PCR)或real-time PCR的高品質(zhì)預(yù)混液,主要用于cDNA和基因組DNA等的特異性高靈敏度定量檢測(cè)。 本制品使用SYBR Green I作為染料。SYBR Green I是一種結(jié)合于雙鏈DNA(dsDNA)雙螺旋小溝區(qū)域的綠色熒光染料。SYBR Green I在游離狀態(tài)下的熒光比較微弱,一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,其熒光會(huì)大大增。這樣通過(guò)檢測(cè)熒光弱就可以定量檢測(cè)PCR過(guò)程中擴(kuò)增產(chǎn)生的雙鏈DNA的數(shù)量。 本制品使用的ByFast Taq DNA Polymerase是一種與抗體結(jié)合的高品質(zhì)熱啟動(dòng)酶,能夠?qū)崿F(xiàn)便捷高效的熱啟動(dòng)。ByFast Taq DNA Polymerase中的Taq酶與抗Taq酶的單克隆抗體相互結(jié)合,從而抑制了Taq酶的DNA聚合酶活性,這樣可以有效避免在低溫條件下由引物和模板DNA非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。在PCR反應(yīng)的預(yù)變性步驟中抗體會(huì)被加熱失活,這樣可以確保僅在預(yù)變性后才會(huì)把Taq酶的活性釋放出來(lái),預(yù)變性之前不會(huì)發(fā)生DNA聚合反應(yīng),從而大大提高了PCR反應(yīng)的特異性、靈敏度和定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性。 本制品包含了ByFast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I熒光染料、穩(wěn)定劑和鎂離子等所有的通用組分,使操作更簡(jiǎn)單、使用更便捷。用戶只需自備引物、樣品DNA和去離子水即可。 保存:-20℃避光保存,一年有效;4℃避光保存,一個(gè)月內(nèi)有效。盡量避免反復(fù)凍融。 規(guī)格說(shuō)明: 本制品如果用于常規(guī)的96孔板qPCR檢測(cè)(建議反應(yīng)體系為20μL),每mL本產(chǎn)品可以進(jìn)行100次檢測(cè);如果用于常規(guī)的384孔板qPCR檢測(cè)(建議反應(yīng)體系為10μL),每mL本產(chǎn)品可以進(jìn)行200次檢測(cè)。 注意事項(xiàng): 使用前需確保整管試劑*融化,上下顛倒輕輕混勻后使用?;靹蜻^(guò)程中盡量避免產(chǎn)生氣泡。 注意引物退火溫度,當(dāng)退火溫度<60℃時(shí),推薦使用三步法PCR擴(kuò)增。 本制品中含有SYBR Green I熒光染料,保存本產(chǎn)品或設(shè)置PCR反應(yīng)時(shí)應(yīng)避免光照射,以盡量避免熒光淬滅問(wèn)題。 對(duì)于過(guò)350bp或者高GC含量的擴(kuò)增片段,建議增加延伸時(shí)間至60秒或者采用三步法以提高擴(kuò)增效率。 經(jīng)測(cè)試,本制品反復(fù)凍融10次對(duì)使用效果無(wú)顯著影響。但仍需盡量避免反復(fù)凍融本產(chǎn)品,反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。 qPCR檢測(cè)是高靈敏度的檢測(cè),PCR反應(yīng)設(shè)置區(qū)域需盡量避免各種可能的待擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。PCR產(chǎn)物宜密封后丟棄,以避免高濃度的PCR產(chǎn)物污染實(shí)驗(yàn)環(huán)境。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
細(xì)菌氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法定量檢測(cè)試劑盒(羥自由基)
氧化物歧化酶(SOD)活性檢測(cè)試劑盒
小鼠狀腺原酸elisa 小鼠狀腺原酸試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠狀腺原酸試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠狀腺原酸試劑盒、小鼠狀腺原酸elisa 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Herbaridine B 中文名: 分子式:C17H20O6 度:%
小鼠狀腺原酸(T3)elisa Horminone 21887-01-4 中文名:7α-羥基羅列酮 分子式:C20H28O4
小鼠狀腺原酸(T3)ELISAKit Hemapolin 中文名:甲基環(huán)硫雄醇中間體 E 分子式:C20H32OS 度:98.0%
小鼠狀腺原酸 英文名稱: T3 Mouse iiodothyronine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): T3 Herbarin 36379-67-6 中文名: 分子式:C16H16O6
小鼠轉(zhuǎn)移趨化生長(zhǎng)因子β 英文名稱: Mouse ansforming Growth Factor β 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): TGFβ Nebivolol 169293-50-9 中文名:鹽酸奈必洛爾 分子式:C22H26ClF2NO4
熒光定量PCR反應(yīng)預(yù)混液(SYBR Green I)香草酸 HPLC≥97% 100mg 小鼠胰高血糖素樣肽2(GLP-2)elisa ,英文名: GLP-2 ELISA Kit
香草乙酮 HPLC≥98% 20mg 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousehiston-H2bELISAKit 96T/48T
HPLC≥98% 20mg 人堿性亮拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白(BATF)試劑盒 Human BATF ELISA Kit
香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg RatapoproteinA1,apo-A1ELISAKit大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)elisa規(guī)格:96T/48T
香荊芥酚 HPLC≥98% 50mg 組蛋白H3-K9甲基化共沉淀分析試劑盒5
香蘭素 HPLC≥98% 20mg MouseAi-nuclearAibody,ANAelisa小鼠抗核抗體(ANA)elisa規(guī)格:96T/48T
香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg 小鼠胰高血糖素樣肽1受體(GLP1R)elisa ,英文名: GLP1R ELISA Kit
香葉醇 HPLC≥98% 20mg 兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit 96T/48T
香葉木素 HPLC≥98% 20mg 犬骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 Canine bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
香葉木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanPAPELISAKit人纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物檢測(cè)(PAP)規(guī)格:96T/48T
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。