上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時間:2022-06-13 11:53:52瀏覽次數(shù):194
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中文名稱:T4 DNA連接酶(400U/μL)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:2萬U|10萬U
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164608
產(chǎn)品介紹:
產(chǎn)品簡介: T4 DNA連接酶在輔助因子ATP的作用下,可催化雙鏈DNA或RNA上的5’-磷酸末端和3’-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,可用于催化平末端或黏性末端之間的連接反應(yīng),也可修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口。在DNA片段與載體、Linker或Adaptor DNA的連接中具有廣泛應(yīng)用。 產(chǎn)品特點(diǎn): 高純度,確保該產(chǎn)品具有高的活性和純度,無核酸酶、外切酶、RNA酶、外源DNA/RNA等污染。 操作說明: 1.在冰浴條件下,將下列反應(yīng)液加入無菌、無核酸酶微量離心管中: a.10×T4 DNA連接緩沖液需于室溫下解凍后混勻。 b.插入DNA的加入量需為載體DNA的3倍摩爾量。 c.T4 DNA連接酶需后加入反應(yīng)體系中。 2.使用移液器輕柔吹打均勻后,短速離心; 3.對于黏性末端,可于16℃孵育過夜或室溫孵育10分鐘;對于平末端或單堿基突出片段,則可于16℃孵育過夜或室溫孵育2小時; 4.置于65℃加熱10分鐘,使酶失活; 5.冰浴冷卻后,取1~5 μL反應(yīng)液轉(zhuǎn)化至50 μL感受態(tài)細(xì)胞中。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
冰凍切片半胱-7(CASPASE-7)活性原位熒光染色檢測試劑盒
活體細(xì)胞半胱-8(CASPASE-8)活性原位熒光染色檢測試劑盒
冰凍切片半胱-8(CASPASE-8)活性原位熒光染色檢測試劑盒
活體細(xì)胞半胱-9(CASPASE-9)活性原位熒光染色檢測試劑盒
冰凍切片半胱-9(CASPASE-9)活性原位熒光染色檢測試劑盒
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)elisa ,英文名: PAI2 ELISA Kit
兔熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA檢測試劑盒RabbitHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit 96T/48T
牛胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)免疫試劑盒 Bovine Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit
英文名稱HumanIgAELISAKitA(IgA)規(guī)格:96T/48T
蛋類L-乳酸比色法定量檢測試劑盒20次
Ratneuophilactivatingprotein-2,NAP-2elisa大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)elisa規(guī)格:96T/48T
T4 DNA連接酶(400U/μL)小鼠可溶性血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa分析檢測試劑盒
小鼠可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1/sFlt1)elisa檢測試劑盒
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。