上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時間:2022-06-13 11:54:09瀏覽次數(shù):202
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中文名稱:pEGFP-N1 哺乳動物表達(dá)載體
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:20μl
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164611
生物醫(yī)學(xué)實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。產(chǎn)品介紹:
GFP-N1編碼野生型GFP的一個紅移變體,已被優(yōu)化,有更亮的熒光,在哺乳細(xì)胞有更高的表達(dá),(大激發(fā)波長=488nm,大釋放波長=507nm)。 EGFP基因編碼序列,含有過190個沉默堿基的變化,這符合人類密碼子使用偏好。 EGFP序列的一側(cè)已經(jīng)轉(zhuǎn)變成和KozaK一致的翻譯起始位點,進(jìn)一步提高了在真核細(xì)胞的翻譯效率。 啟動子:CMV 復(fù)制子:pUC ori,f1 ori 終止子:SV40 ploy(A) 載體別名:pEGFPN1,pEGFP N1 載體分類:哺乳細(xì)胞表達(dá)載體,熒光蛋白報告載體 載體大?。?/span>4733bp 載體標(biāo)簽:增型熒光蛋白報告基因EGFP 原核抗性:卡那(Kanamycin) 篩選標(biāo)記:新(Neomycin) 克隆菌株:DH5α 表達(dá)宿主:哺乳細(xì)胞 培養(yǎng)條件:37℃,LB培養(yǎng)基 5' 測序引物:CMV-F:5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3' 3' 測序引物:EGFP-N:5'-CGTCGCCGTCCAGCTCGACCAG-3' 備注:載體的MCS多克隆酶切位點,有EcoR I,BamH I等酶切位點。 儲存條件:-20℃ |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
冰凍切片甘油三脂脂酶法格莫瑞(Gomori)染色試劑盒
細(xì)胞脂肪酸費斯克勒(Fischler)染色試劑盒
冰凍切片脂肪酸費斯克勒(Fischler)染色試劑盒
石蠟切片脂肪酸費斯克勒(Fischler)間接染色試劑盒
石蠟切片脂肪酸費斯克勒(Fischler)直接染色試劑盒
小鼠突觸融合蛋白2(STX2)elisa ,英文名: STX2 ELISA Kit
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA檢測試劑盒MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISAKit 96T/48T
人胱天蛋白酶3(Casp-3)免疫試劑盒 Human Caspase 3,Casp-3 ELISA Kit
RatEsadiol,E2ELISAKit大鼠雌二醇(E2)elisa規(guī)格:96T/48T
6%次氯酸溶液100毫升
MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3elisa小鼠游離三甲狀腺原氨酸(Free-T3)elisa規(guī)格:96T/48T
pEGFP-N1 哺乳動物表達(dá)載體小鼠骨鈣素(OT)elisa檢測試劑盒
小鼠骨鈣素(OT)elisa檢測試劑盒
小鼠骨鈣素(OC)elisa檢測試劑盒
小鼠骨鈣素(BGP)elisa檢測試劑盒
小鼠骨鈣素(BGP)elisa檢測試劑盒