上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時間:2022-06-13 11:17:54瀏覽次數(shù):144
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生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱:一管式定點(diǎn)突變試劑盒
英文名稱:One Tube Site-specific Mutagenesis Kit
產(chǎn)品規(guī)格:10次|20次
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0164566
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒是基于PCR原理向目的DNA片段(一般為質(zhì)粒)中引入堿基的點(diǎn)突變,多個鄰近密碼子的突變,單個或多個鄰近密碼子的缺失(deletion)或插入(insertion)等。一般宿主菌培養(yǎng)擴(kuò)增的質(zhì)粒DNA是甲基化的,PCR擴(kuò)增新合成的DNA是非甲基化的。先以待突變的甲基化質(zhì)粒為模板,用快高保真的SuperPfu聚合酶實(shí)現(xiàn)突變質(zhì)粒的合成(非甲基化,包含突變點(diǎn),且有兩個缺刻點(diǎn)nick點(diǎn)),再用Dpn I酶選擇性降解甲基化的模板質(zhì)粒 ,剩下的新合成非甲基化的突變質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌后,質(zhì)粒中有兩個nick位點(diǎn)可以被大腸桿菌修復(fù),得到的克隆就會含有預(yù)期的突變質(zhì)粒了。一般可以產(chǎn)生大于90%的突變效率。本試劑盒適用于<12kb甲基化質(zhì)粒中核苷酸的突變。 試劑盒組分(10次): SuperPfu DNA polymerase——————5μl 10×SuperPfu Buffer————————100μl Dpn I——————-——————-——5μl 10mM dNTP Mixture-——————-——25μl 試劑盒特點(diǎn): 1、簡單,一個PCR管中完成所有操作,速度快。 2、采用部分重疊引物設(shè)計(jì),使PCR呈指數(shù)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳可見增加成功率。 3、效率高,使用Dpn I去除非突變模板,突變效率高達(dá)90%;不需要使用特殊感受態(tài)細(xì)胞降解非突變質(zhì)粒。 4、采用分子進(jìn)化改造的SuperPfu可以提供4倍-6倍于pfu的擴(kuò)增速率提高和3倍于pfu的高保真性。 儲存條件:-20℃,有效期一年。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
RNA純化試劑專題
大量總RNA氯化銫純化試劑盒
全血總RNA純化試劑盒
組織總RNA純化試劑盒
細(xì)胞總RNA純化試劑盒
聚酰胺粉(柱層析用,10-30目) Polyamide 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用,10-30目 大鼠激素/酮(PROG)ELISA檢測試劑盒RatProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T
氫二鈉,二水(for HPLC, ≥99%(T)) phosphate dibasic dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC, ≥99%(T) 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒 Human HIF-1α ELISA Kit
(農(nóng)殘級) sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級 Ratniicoxide,NOELISAKit大鼠(NO)elisa規(guī)格:96T/48T
(for HPLC,≥99.0%(T)) sulfate anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T) ERK蛋白共沉淀分析試劑盒5
(for HPLC,≥99.0%) bicarbonate 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0% MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4elisa小鼠醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)elisa規(guī)格:96T/48T
四丁基化銨(離子對色譜級) Tetrabutylammonium iodide 質(zhì)量規(guī)格:離子對色譜級 小鼠亮酸豐富重復(fù)LGI家族成員3(LGI3)elisa ,英文名: LGI3 ELISA Kit
三辛胺(離子對試劑) Trioctylamine 質(zhì)量規(guī)格:離子對試劑 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA檢測試劑盒HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 96T/48T
草酸鈉容量分析用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(0.05M) oxalate solution 質(zhì)量規(guī)格:0.05M 大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)試劑盒 Rat platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit
剛果紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC)) Congo red 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC) 英文名稱RatHistoneDeacetylaseELISAKit大鼠組織蛋白去乙?;?/span>(HD)規(guī)格:96T/48T
正癸酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Decanoic acid 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 鈣離子膜通道內(nèi)質(zhì)網(wǎng)羅丁受體(ryanodinereceptor;RyR)功能熒光檢測試劑盒20
一管式定點(diǎn)突變試劑盒活性炭(凈水、氣體化,棒,φ4.0mm) Activated charcoal 質(zhì)量規(guī)格:凈水、氣體化,棒,φ4.0mm 犬K1(VK1)試劑盒 Canine Vitamin K1,VK1 ELISA Kit
活性炭(藥物脫色,200目) Activated charcoal 質(zhì)量規(guī)格:藥物脫色,200目 犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA檢測試劑盒Canineiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit 96T/48T
活性炭(細(xì)胞培養(yǎng)級) Activated charcoal 質(zhì)量規(guī)格:細(xì)胞培養(yǎng)級 犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒 Dog iercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA Kit
活性炭(植物細(xì)胞培養(yǎng)級) Activated charcoal 質(zhì)量規(guī)格:植物細(xì)胞培養(yǎng)級 犬細(xì)小病毒(PV)抗體(IgG)試劑盒 Dog parvovirus(PV)aibody IgG ELISA kit
10X分子篩(干燥劑用) 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用 犬纖溶酶原激活物抑制劑1(SERPINE1)試劑盒 Dog plasminogen activator inhibitor 1,SERPINE1 ELISA kit
13X分子篩(60-80目,氣相、液相色譜柱) Molecular sieves Type 13X 質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱 犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒 Canine Cardiac oponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit
13X分子篩(80-100目,氣相、液相色譜柱) Molecular sieves Type 13X 質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱 犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 Canine cardiac isoform of opnin T,c ELISA Kit
13X分子篩(40-60目,氣相、液相色譜柱) Molecular sieves Type 13X 質(zhì)量規(guī)格:40-60目,氣相、液相色譜柱 犬心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)試劑盒 Canine hea fatty acid binding protein,h-FABP ELISA Kit
13X分子篩(干燥劑用) Molecular sieves Type 13X 質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用 犬胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)試劑盒 Canine thymus activation regulated chemokine,TARC/CCL17 ELISA Kit
13X分子篩(3-5mm,球形) Molecular sieves Type 13X 質(zhì)量規(guī)格:3-5mm,球形 犬胸腺基質(zhì)細(xì)胞生成素(TSLP)試劑盒 Dog TSLP ELISA Kit
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。