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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時間:2018-05-11 13:48:29瀏覽次數(shù):227次
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Human CD5L ELISA Kit
?規(guī)格: 96T
檢測范圍:156pg/ml→10,000pg/ml。
特異性: 系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)。
敏感性: <5pg/ml
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清。
Human CD5L ELISA Kit
規(guī)格: 96T
檢測范圍:156pg/ml→10,000pg/ml。
特異性: 系統(tǒng)和其它細(xì)胞因子無交叉反應(yīng)。
敏感性: <5pg/ml
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清。
Human CD5L ELISA Kit工作原理
所提供的人 CD5L ELISA Kit 是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(Enzyme
Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA)。預(yù)先包被的抗體和檢測相抗體都是親和純化多克隆抗體。
檢測相抗體經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS 或
TBS 洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過 PBS 或 TBS 的*洗滌后用底物 TMB
顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深
淺和樣品中的 CD5L 呈正相關(guān)。
內(nèi)容 | 規(guī)格 | 數(shù)量 |
預(yù)包被抗CD5L 抗體的 96 孔板 | 96T | 1 |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 10ng/管 | 2 |
生物素標(biāo)記 | 130ul | 1 |
親和素-過氧化物酶復(fù)合物 | 130ul | 1 |
樣品稀釋液 | 30ml | 1 |
抗體稀釋液 | 12ml | 1 |
ABC 稀釋液 | 12ml | 1 |
TMB 顯色液 | 10ml | 1 |
TMB 終止液 | 10ml | 1 |
洗滌緩沖液(25X) | 20ml | 1 |
封板膜 |
| 2 |
說明書 |
| 1 |
需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
2. 自動洗板機(jī)。
3. 恒溫箱
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 用去離子水將 25X 洗滌緩沖液稀釋 25 倍,成 1X 洗滌緩沖液。
注意事項
1. 使用前 TMB 顯色液應(yīng)為無色透明溶液,若發(fā)現(xiàn)顏色異常,請及時與廠家。
2. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
3 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活。
4. 為免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。
5. 禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。
6. 本公司提供的 96 孔酶標(biāo)板是單條可拆型酶標(biāo)板,用戶可按需求使用;剩余的酶標(biāo)板請
按保存條件貯存。
7. 揭封板膜和覆蓋封板膜時應(yīng)避免用力過大導(dǎo)致液體濺出。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將 1X 洗滌緩沖液至少 300ul 注入孔內(nèi),浸泡 1-2 分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
樣品的準(zhǔn)備和保存
樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞培養(yǎng)上清——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固 30 分鐘,離心 1500×g 15 分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血漿—在冰塊上收集肝素或 EDTA 抗凝血,抽血后 30 分鐘內(nèi)離心 1500×g 15 分鐘。血漿在 2-8℃進(jìn)一步離心 10000×g 10 分鐘,以*清除血小板。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細(xì)胞裂解液——對于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常 10 秒后,細(xì)胞就會被裂解。對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打把細(xì)胞吹散,用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后,10000—14000g 離心 3-5 分鐘,取上清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
樣品稀釋的一般原則
用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA 試劑盒的*檢測范圍。根據(jù)待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的
稀釋方案:
高——指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297ul 樣品稀釋液加 3ul 樣品。
中——指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225ul 樣品稀釋液加 25ul 樣品。
低——指待測因子在 31.2-2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100ul 樣品稀釋液加 100ul 樣品。
特低——指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,或按 1:2 稀釋。
操作程序總結(jié):
1. 加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng) 90 分鐘。不洗。
2. 加生物素標(biāo)記抗體,37℃反應(yīng) 60 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 3 次。
3. 加 ABC,37℃反應(yīng) 30 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 5 次。
4. TMB37℃反應(yīng) 15-20 分鐘。
5. 加入 TMB 終止液,讀數(shù)。
人 甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶-2 MASP-2 Mannose Associated Serine Protease 2
人 甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶 MASP mannan binding lectin associated serine protease
人 甘露糖結(jié)合蛋白;甘露糖結(jié)合凝集素 MBP;MBL Mannma binding protein;mannan binding lectin
人 甘露糖受體 MR mannose receptor
人 甘油醛-3-磷酸脫氫酶 GAPDH glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
人 甘油三酯 TG Triglyceride
人 肝癌衍生生長因子 HDGF hepatoma-derived growth factor
人 肝配蛋白B3 ephrin-B3 ephrin-B3
人 肝素輔因子Ⅱ HCⅡ heparin cofactor Ⅱ
人 肝素結(jié)合性表皮生長因子 HB-EGF heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor
人 肝細(xì)胞癌結(jié)合蛋白TD26 TD26 Hepatocellular carcinoma-associated protein TD26
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