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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2018-05-21 09:45:31瀏覽次數(shù):133次
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大鼠胰島素樣生長因子-1( IGF-1)試劑盒
規(guī)格: 96T
檢測范圍:62.5pg/ml→4000pg/ml
敏感性: <5pg/ml
特異性: 系統(tǒng)和 IGF-2 的交叉反應(yīng)<1%.
保存: 2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(長時(shí)間不用時(shí))。
有效期: 6 個(gè)月(4℃);12 個(gè)月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析大鼠血清、血漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清。
大鼠胰島素樣生長因子-1( IGF-1)試劑盒
規(guī)格: 96T
檢測范圍:62.5pg/ml→4000pg/ml
敏感性: <5pg/ml
特異性: 系統(tǒng)和 IGF-2 的交叉反應(yīng)<1%.
保存: 2-8℃(頻繁使用時(shí));-20℃(長時(shí)間不用時(shí))。
有效期: 6 個(gè)月(4℃);12 個(gè)月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析大鼠血清、血漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清。
大鼠胰島素樣生長因子-1( IGF-1)試劑盒工作原理
Insulin-like growth factor 1, IGF-1。胰島素樣生長因子-1。和胰島素、IGF-2 有很高的同源性。IGF-1
的前體有 A、B 兩種亞型,氨基酸數(shù)目不等。但成熟形態(tài)都是相同的 70 個(gè)氨基酸,分子量 7.6KDa,分子內(nèi)通過三個(gè)二硫鍵連接。IGF-1 通過相應(yīng)的受體(IGF-1R)發(fā)揮對(duì)細(xì)胞的促生長作用,包括纖維母細(xì)胞、骨母細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、胚胎腦細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、紅細(xì)胞干細(xì)胞等。在腫瘤細(xì)胞中 IGF-1R 都有過高的表達(dá)。癌癥患者血中的 IGF1 也有不同程度的增高。
所提供的大鼠 IGF-I ELISA Kit 是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(EnzymeLinked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA)。預(yù)先包被的抗體為單克隆抗體,克隆號(hào) 126002。檢測相抗體為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS 或 TBS 洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過 PBS 或 TBS 的*洗滌后用底物 TMB 顯色。TMB 在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠 IGF-I 呈正相關(guān)。
內(nèi)容 | 規(guī)格 | 數(shù)量 |
預(yù)包被抗 IGF-1)抗體的 96 孔板 | 96T | 1 |
凍干標(biāo)準(zhǔn)品 | 10ng/管 | 2 |
生物素標(biāo)記 | 130ul | 1 |
親和素-過氧化物酶復(fù)合物 | 130ul | 1 |
樣品稀釋液 | 30ml | 1 |
抗體稀釋液 | 12ml | 1 |
ABC 稀釋液 | 12ml | 1 |
TMB 顯色液 | 10ml | 1 |
TMB 終止液 | 10ml | 1 |
洗滌緩沖液(25X) | 20ml | 1 |
封板膜 |
| 2 |
說明書 |
| 1 |
大鼠胰島素樣生長因子-1( IGF-1)試劑盒需要而未提供的試劑和器材
1. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
2. 自動(dòng)洗板機(jī)。
3. 恒溫箱
4. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器。
5. 干凈的試管和 Eppendof 管。
6. 用去離子水將 25X 洗滌緩沖液稀釋 25 倍,成 1X 洗滌緩沖液。
注意事項(xiàng)
1. 使用前 TMB 顯色液應(yīng)為無色透明溶液,若發(fā)現(xiàn)顏色異常,請(qǐng)及時(shí)與廠家。
2. 用戶在初次使用試劑盒時(shí),應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
3 要嚴(yán)格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會(huì)使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活。
4. 為免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。
5. 禁止混用不同批次試劑盒內(nèi)的試劑。
6. 本公司提供的 96 孔酶標(biāo)板是單條可拆型酶標(biāo)板,用戶可按需求使用;剩余的酶標(biāo)板請(qǐng)
按保存條件貯存。
7. 揭封板膜和覆蓋封板膜時(shí)應(yīng)避免用力過大導(dǎo)致液體濺出。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將 1X 洗滌緩沖液至少 300ul 注入孔內(nèi),浸泡 1-2 分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
樣品的準(zhǔn)備和保存
樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞培養(yǎng)上清——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固 30 分鐘,離心 1500×g 15 分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血漿—在冰塊上收集肝素或 EDTA 抗凝血,抽血后 30 分鐘內(nèi)離心 1500×g 15 分鐘。血漿在 2-8℃進(jìn)一步離心 10000×g 10 分鐘,以*清除血小板。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細(xì)胞裂解液——對(duì)于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常 10 秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液,用槍吹打把細(xì)胞吹散,用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后,10000—14000g 離心 3-5 分鐘,取上清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
樣品稀釋的一般原則
用戶須估計(jì)樣品待測因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA 試劑盒的*檢測范圍。根據(jù)待測因子含量高、中、低的不同,分別采取不同的
大鼠胰島素樣生長因子-1( IGF-1)試劑盒稀釋方案:
高——指待測因子在 20-200ng/ml。一般按 1:100 稀釋。297ul 樣品稀釋液加 3ul 樣品。
中——指待測因子在 2-20ng/ml。一般按 1:10 稀釋。225ul 樣品稀釋液加 25ul 樣品。
低——指待測因子在 31.2-2000pg/ml。按 1:2 稀釋。100ul 樣品稀釋液加 100ul 樣品。
特低——指待測因子≤31.2pg/ml。樣品一般不做稀釋,或按 1:2 稀釋。
操作程序總結(jié):
1. 加樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,37℃反應(yīng) 90 分鐘。不洗。
2. 加生物素標(biāo)記抗體,37℃反應(yīng) 60 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 3 次。
3. 加 ABC,37℃反應(yīng) 30 分鐘。1X 洗滌緩沖液洗滌 5 次。
4. TMB37℃反應(yīng) 15-20 分鐘。
5. 加入 TMB 終止液,讀數(shù)。
魚 δ氨基乙酰丙酸脫水酶 ALAD δ-Aminolevulinic Acid Dehydratase
魚 白細(xì)胞介素1 IL-1 Interleukin 1
魚 白細(xì)胞介素1β IL-1β Interleukin 1β
魚 白細(xì)胞介素6 IL-6 Interleukin 6
魚 白細(xì)胞介素8 IL-8 Interleukin 8
魚 表皮生長因子 EGF Epidermal growth factor
魚 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 ALT Alanine Aminotransferase
魚 丙二醛 MDA malondialchehyche
魚 丙酮酸激酶 PK Pyruvate kinase
魚 丙酮酸羧化酶 PEPCase pyruvate carboxylase
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主營產(chǎn)品:ELISA試劑盒,重組蛋白,抗體 ,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,生化試劑,實(shí)驗(yàn)耗材,進(jìn)口品牌代購等科研產(chǎn)品
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