CT26.WT小鼠結腸癌細胞（STR鑒定）

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更新時間：2018-05-25 16:06:54瀏覽次數：972次

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產品簡介

CT26.WT小鼠結腸癌細胞（STR鑒定）CT26細胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷（NNMU）誘導得到的未分化的小鼠結腸癌細胞，該細胞的一個克隆形成的細胞系被命名為CT26.WT。CT26.WT被逆轉錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25，這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因、編碼腫瘤相關抗原（TAA）和beta半乳
英文名稱:Mouse Colon Cancer Cells

詳細介紹

CT26.WT小鼠結腸癌細胞（STR鑒定）
英文名稱：Mouse Colon Cancer Cells
規(guī)格：1*10 ⁶
細胞介紹
CT26細胞是被N-亞硝基-N-甲基脲烷（NNMU）誘導得到的未分化的小鼠結腸癌細胞，該細胞的一個克隆形成的細胞系被命名為CT26.WT。CT26.WT被逆轉錄病毒載體LXSN穩(wěn)定轉化形成了一個致死性的亞克隆CT26.CL25，這一病毒載體含有l(wèi)acZ基因、編碼腫瘤相關抗原（TAA）和beta半乳糖苷酶。CT26.WT和CT26.CL25細胞在小鼠中生長速度和致死率都很相似，不同的是CT26.CL25細胞可以表達腫瘤相關抗原和beta半乳糖苷酶，因此這兩株細胞可以聯(lián)合用于免疫治療和宿主免疫反應的研究。
一、細胞特性
1）來源：小鼠結腸癌
2）形態(tài)：成纖維細胞樣，貼壁生長
3）含量：>1x106 個/mL
4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
CT26.WT小鼠結腸癌細胞（STR鑒定）在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，懸浮細胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
三、細胞培養(yǎng)步驟
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標準是什么？
（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；