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即用型熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

即用型熒光定量PCR試劑盒本產(chǎn)品是基于熒光染料檢測(cè)的即用型PCR試劑盒，可以對(duì)靶片段進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR分析（quantitative PCR、qPCR）。產(chǎn)品含有經(jīng)過(guò)優(yōu)化的緩沖液組分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型熒光染料DNAgreen等所有實(shí)時(shí)定量PCR所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)和HRM分析，具有廣泛的用途。

詳細(xì)介紹

即用型熒光定量PCR試劑盒

名稱	規(guī)格	價(jià)格	手冊(cè)
即用型熒光定量PCR試劑盒	1mL	230元

本產(chǎn)品是基于熒光染料檢測(cè)的即用型PCR試劑盒，可以對(duì)靶片段進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR分析（quantitative PCR、qPCR）。產(chǎn)品含有經(jīng)過(guò)優(yōu)化的緩沖液組分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型熒光染料DNAgreen等所有實(shí)時(shí)定量PCR所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)和HRM分析，具有廣泛的用途。

1. 方便，用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)和HRM（High Resolution DNA Melt Curve Analysis）分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix則不能同時(shí)用于上述兩種實(shí)驗(yàn)。

2. 使用第三代飽和型熒光染料，信號(hào)強(qiáng)，不會(huì)抑制PCR反應(yīng)。

3. 快捷，即用型的預(yù)配液使加樣操作步驟大大簡(jiǎn)化，避免了交叉污染，降低實(shí)驗(yàn)誤差。

4. 各成分的濃度和比例都經(jīng)過(guò)精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高，特異性強(qiáng)。能檢測(cè)到濃度為50拷貝/mL的靶分子。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開(kāi)。水相層(無(wú)色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測(cè)定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來(lái)的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過(guò)離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來(lái)而被除去。
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