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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2018-06-15 15:38:38瀏覽次數(shù):367次
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DTT,免稱量蛋白級本產(chǎn)品是以干燥、室溫穩(wěn)定、一次性使用的形式提供的分裝好的二硫蘇糖醇,外包裝是鋁箔封口的微量管。每個管含有7.7毫克的DTT,僅需加入100微升水或緩沖液即可配制成500mM的溶液。使用這種方便的產(chǎn)品則不需要浪費時間和精力去制備儲存液。
DTT,免稱量蛋白級
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
DTT,免稱量蛋白級 | 48管 | 詢價 |
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本產(chǎn)品是以干燥、室溫穩(wěn)定、一次性使用的形式提供的分裝好的二硫蘇糖醇,外包裝是鋁箔封口的微量管。每個管含有7.7毫克的DTT,僅需加入100微升水或緩沖液即可配制成500mM的溶液。使用這種方便的產(chǎn)品則不需要浪費時間和精力去制備儲存液。
本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 節(jié)省時間,加入100微升水,吸取所需體積的溶液即可。
2. 減少浪費,可以簡單地制備一次性用量的(100微升)500mM DTT。
3. 儲存簡單,不需要擔(dān)心儲存液的穩(wěn)定性和降解;僅需制備當(dāng)天所需的量即可,將多余的產(chǎn)品仍以穩(wěn)定、干燥、未開封的狀態(tài)儲存即可。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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