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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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更新時間:2018-06-19 14:32:58瀏覽次數(shù):363次
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植物葉綠體純化試劑盒葉綠體是重要的,負責植物光合作用的細胞器,很多重要的特性(如雄性不育)也跟葉綠體相關,所以葉綠體是研究植物生理和母系遺傳的重要材料。對植物葉綠體進行生化,遺傳和分子生物學研究都需要進行葉綠體純化。本產(chǎn)品就是基于密度梯度離心的,專門用于從植物葉片中純化完整葉綠體的試劑盒。它具有下列特點:
植物葉綠體純化試劑盒
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
植物葉綠體純化試劑盒 | 15次 | 890元 |
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葉綠體是重要的,負責植物光合作用的細胞器,很多重要的特性(如雄性不育)也跟葉綠體相關,所以葉綠體是研究植物生理和母系遺傳的重要材料。對植物葉綠體進行生化,遺傳和分子生物學研究都需要進行葉綠體純化。本產(chǎn)品就是基于密度梯度離心的,專門用于從植物葉片中純化完整葉綠體的試劑盒。它具有下列特點:
1. 即用型試劑盒,用戶不需要單獨配制各種溶液。
2. 提供A、B兩種選擇,A型用于葉綠體粗提,B型用于葉綠體精提,
3. 粗提葉綠體可用于后續(xù)的SDS-PAGE,Western,ELSIA和蛋白組分析。
4. 精提所得葉綠體完整,可用于后續(xù)的光合作用,電子鏈和磷酸化,跨膜轉(zhuǎn)運,
體外葉綠體蛋白合成,蛋白定位等研究。 還可用于葉綠體膜,基質(zhì),類
囊體,葉綠體DNA和葉綠體RNA純化。
5. 本產(chǎn)品足夠15次提取,每次可處理30g葉片,能得到5 mg左右葉綠體。
6. 已經(jīng)成功用于菠菜,大豆,萵筍,白菜,煙草和甜菜等植物,還可用于更多植
物(可能需要優(yōu)化條件)。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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