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| 參考價 | ￥960 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 96T | 960元 | 1 盒 可售 |
更新時間：2024-06-06 10:08:45瀏覽次數(shù)：208
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土壤脫氫酶(S-DHA)試劑盒,微板法
土壤脫氫酶(S-DHA)試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤脫氫酶（Soil dehydrogenase, S-DHA）試劑盒說明書 (貨號：WS7030W 微板法 96 樣) 一、產(chǎn)品簡介： 土壤脫氫酶的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機(jī)物的降解活性，以評價降解性能。傳 統(tǒng)方法是用氯化三苯基四氮唑（TTC）作為脫氫酶的氫受體，但生成的有色物質(zhì)甲臜是不溶于水以至操作 麻煩，且靈敏度低；本試劑盒提供一種簡單，靈敏，快速的測定方法，利用改性的氮四唑鹽作為氫受體， 其生成的黃色甲臜物質(zhì)易溶于水，于 460nm 測定其吸光值，即得土壤脫氫酶活性。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格試劑名稱 保存要求 試劑一 液體 6mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 80mL×1 瓶 4℃保存 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī)。 四、土壤脫氫酶的測定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備：取新鮮土樣過 40 目篩網(wǎng)，備用。 2、測定步驟： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min，調(diào)節(jié)波長到 460 nm。 ② 在 EP 管內(nèi)依次加入： 試劑名稱（μL） 測定管 空白管 鮮土 0.1g 試劑一 60 60 試劑二 640 640 劇烈混勻幾次，37℃（水浴鍋或恒溫培養(yǎng)箱）避光培養(yǎng) 4h（中間隔段時間 晃動幾下），12000rpm 離心 5min，取 200μL 上清液轉(zhuǎn)移到 96 孔板中， 460nm 處讀取吸光值 A，△A=A 測定-A 空白。 【注】1.注意觀察，隨著反應(yīng)時間的延長，反應(yīng)液呈現(xiàn)黃色，酶活性越大，黃色越深。 2.若同時檢測不同背景下的土壤樣本（如黑土，紅土，黃土等），則需增加樣本自身對照管， 即空白管變?yōu)閷φ展埽?.1g 鮮土+700μL 試劑二），△A=A 測定-A 對照。 3.對于活性較高的樣本，若培養(yǎng) 4 小時，A 值測定超過 2 以上，可縮減培養(yǎng)時間（如改為 2 個小時），則改變后的培養(yǎng)時間需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 酶活單位定義：在 37℃時，每克土壤樣品每天催化產(chǎn)生 1μg 甲臜物質(zhì)為一個酶活性單位。 S-DHA(μg/d/g 鮮土)=(△A÷ε÷d×V1×106×Mr)÷(W×V1÷V2)÷T=169.2×△A÷W ε----甲臜物質(zhì)的摩爾消光系數(shù)，3.1×104 L / mol /cm； V1----96 孔板的檢測總體積，200μL =0.2mL=2×10-4L； d----光徑，0.5cm； V2----EP 管中反應(yīng)總體積，700μL=0.7mL； T----培養(yǎng)時間，4h=1/6d； W----樣品質(zhì)量，g； Mr----甲臜物質(zhì)的分子量，624.47。
