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鎮(zhèn)江博研生物科技有限公司
ELISA
生產(chǎn)商
上海市
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更新時間:2021-07-28 11:36:50瀏覽次數(shù):129次
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產(chǎn)品貨號:BYS-10570B
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做ELISA的經(jīng)驗(yàn)總結(jié):
1、包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識破,所以保存抗原很重要,做重組蛋白時,一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。
2、包被液的選擇,一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液,但有時由于試驗(yàn)的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖液來包。應(yīng)注意以下原理:由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用,這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)部較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán),骨更易吸附到固相載體表面。
3、封閉:繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的在吸附。常用封閉劑有0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較廉價,可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。但終選用什么,要依據(jù)試驗(yàn)具體來實(shí)踐。
4、洗滌板:可以說是ELISA操作中,洗滌是主要的關(guān)鍵技術(shù)。因?yàn)榫郾揭蚁┑人芰蠈Φ鞍踪|(zhì)的吸附是普遍性的,為達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的,清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性的吸附的干擾物質(zhì),在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。所以在洗板時會有一定誤差,人為因素很大(當(dāng)然有條件的用洗板機(jī)除外),洗的不徹底或串了孔,對如此靈敏的ELISA系統(tǒng)可是不小的影響。
5、加抗體標(biāo)本(和二抗):注意該換槍頭時換槍頭。標(biāo)本稀釋一般可用pbs稀釋,也可用封閉液去稀釋。如需加二抗,還要注意二抗的工作濃度,太高浪費(fèi),太低則著色淺。
6、顯色:顯色系統(tǒng)有很多,我們一開始的時候,要選擇適宜的顯色系統(tǒng)。注意顯色系統(tǒng)酶活性底物的保存HRP結(jié)合物加硫柳泵,AP結(jié)合物可加疊氮鈉。
7、每次做盡量要把陰陽空三個對照做好,如出現(xiàn)問題也好分析。
大鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 Rat Soluble protein-100,S-100 ELISA試劑盒
大鼠S-100b 蛋白 Rat Soluble protein-100B ELISA試劑盒
大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 Rat Soluble protein-100B,S-100B ELISA試劑盒
大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 Rat soluble P-selectin,sP-selectin ELISA試劑盒
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒 Rat soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA試劑盒
大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA試劑盒
大鼠可溶性Toll樣受體6(sTLR6)ELISA試劑盒 Rat soluble Toll-like receptor 6,sTLR-6 ELISA試劑盒
大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA試劑盒 Rat soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA試劑盒
大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒 Rat soluble Vascuolar cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA試劑盒
大鼠可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體(sFlt) Rat Soluble Vascular Endothelial Growth Factor Receptor ,sFlt/sVEGFR ELISA Kit
人抗類固醇細(xì)胞抗體ELISA試劑盒 酶標(biāo)板可以拆卸,分幾次用,如果設(shè)立雙標(biāo)準(zhǔn),可以做三次;如果設(shè)定單標(biāo)準(zhǔn),可以做6次
標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合的四種:對數(shù),指數(shù),二次函數(shù)和直線
試劑盒應(yīng)用用于:實(shí)驗(yàn)室研究使用。
實(shí)驗(yàn)儀器:酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、離心機(jī)、培養(yǎng)箱等
試劑盒檢測:操作簡單、快速、敏感性高、特異性強(qiáng)
elisa原理:應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中P53的水平。
發(fā)貨:現(xiàn)貨
有效期:6個月
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