細(xì)胞劃痕法是簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)特性的方法之一。其借鑒體外細(xì)胞致傷愈合實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，在體外培養(yǎng)的單層細(xì)胞上，劃痕致傷，然后加入藥物或者通過過表達(dá)或者干擾其基因表達(dá)觀察其抑制腫瘤細(xì)胞遷移的能力。

詳細(xì)介紹

細(xì)胞劃痕介紹：

細(xì)胞劃痕是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法，實(shí)驗(yàn)成本低，可以用來檢測(cè)貼壁生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。

細(xì)胞劃痕內(nèi)容：

材料：6 孔板（其他的也可以，但感覺6孔比較好，大小適中）、marker筆直尺、20微升槍頭（滅菌）、無血清培養(yǎng)基、PBS

步驟：能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺(tái)內(nèi)）

1．先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃?rùn)M線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。

2．在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。

3．第二天用槍頭比著直尺，盡量垂至于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不能傾斜。

4．用PBS洗細(xì)胞3次，去處劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。

5．放入37度5%co2培養(yǎng)箱，培養(yǎng)。按0，6，12，24小時(shí)取樣，拍照。

細(xì)胞劃痕注意事項(xiàng)：

一般做劃痕實(shí)驗(yàn)，都是在無血清或者底血清狀態(tài)下培養(yǎng)的，否則細(xì)胞增殖就不能忽略。

按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點(diǎn)，作為固定的檢測(cè)點(diǎn)，這就解決了前后觀察時(shí)位置不固定的問題。

目前，上海達(dá)為科生物科技有限公司，主營(yíng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、動(dòng)物模型構(gòu)建等，歡迎廣大科研愛好者前來咨詢選購！

關(guān)鍵詞：培養(yǎng)箱

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細(xì)胞劃痕

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