上海分光光度計(jì)的基本構(gòu)成是用一個(gè)分光器件（棱鏡、鏡子）把一個(gè)光源的光分成兩路（確保兩個(gè)光的波長(zhǎng)一致）分別照射在相同的透光容器中的樣品（被測(cè)）和基準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)，已知濃度、成分）溶液，然后對(duì)比穿過后的光線（對(duì)比樣品和基準(zhǔn)的顏色），即可對(duì)樣品和基準(zhǔn)的一致性做出定性判斷（如：是否達(dá)標(biāo)）。通過樣品與多個(gè)基準(zhǔn)的對(duì)比可以對(duì)樣品做出定量分析。
選擇可見和紫外可見的分光光度計(jì)所關(guān)注的關(guān)鍵的指標(biāo)有三點(diǎn)：一是波長(zhǎng)范圍，二是波長(zhǎng)準(zhǔn)確度，三是雜散光參數(shù)。波長(zhǎng)范圍的選擇是由用戶實(shí)驗(yàn)需要所定，波長(zhǎng)范圍越寬的價(jià)格越貴;波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及雜散光參數(shù)的數(shù)值越低，表示性能越好。
使用上海分光光度計(jì)的步驟與方法：
?。?）預(yù)熱儀器：
為使測(cè)定穩(wěn)定，將電源開關(guān)打開，使儀器預(yù)熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續(xù)光照。預(yù)熱儀器時(shí)和在不測(cè)定時(shí)應(yīng)將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。
?。?）選定波長(zhǎng)：
根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求，轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)調(diào)節(jié)器，使指針指示所需要的單色光波長(zhǎng)。
?。?）固定靈敏度檔：
根據(jù)有色溶液對(duì)光的吸收情況，為使吸光度讀數(shù)為0.2～0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動(dòng)靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實(shí)驗(yàn)過程中不再變動(dòng)。一般測(cè)量固定在“1”檔。
?。?）調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)：
輕輕旋動(dòng)調(diào)“0”電位器，使讀數(shù)表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時(shí)，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。
?。?）調(diào)節(jié)T=99%：
將盛蒸餾水(或空白溶液或純?nèi)軇?的比色皿放入比色皿座架中的格內(nèi)，有色溶液放在其它格內(nèi)，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉(zhuǎn)動(dòng)光量調(diào)節(jié)器，使透光度T=99%，即，表頭指針恰好指在T=99%處。
?。?）測(cè)定：
輕輕拉動(dòng)比色皿座架拉桿，使有色溶液進(jìn)入光路，此時(shí)表頭指針?biāo)緸樵撚猩芤旱奈舛華，讀數(shù)后，打開比色皿暗箱蓋。
（7）關(guān)機(jī)：
實(shí)驗(yàn)完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。
