曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)儀器（Open field test）

研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物在敞箱中，由于對(duì)于新異環(huán)境的恐懼，主要在敞箱內(nèi)的周邊部活動(dòng)，而在*區(qū)活動(dòng)較少，但是動(dòng)物的探究本性有必然促使它試圖在敞箱的*區(qū)活動(dòng)（包括活動(dòng)、飲水或進(jìn)食），從而產(chǎn)生沖突行為?？菇箲]藥物在不改變動(dòng)物一般運(yùn)動(dòng)的情況下可以增加實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入敞箱中*區(qū)的次數(shù)和*區(qū)停留時(shí)間，或者增加實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在*區(qū)的飲水時(shí)間延長(zhǎng)，提示動(dòng)物的沖突行為減少；致焦慮劑則相反，使得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在*區(qū)的活動(dòng)時(shí)間或飲水時(shí)間減少，即表示動(dòng)物的沖突狀態(tài)加劇。因此敞箱實(shí)驗(yàn)來評(píng)價(jià)藥物的抗焦慮和致焦慮作用。因此敞箱實(shí)驗(yàn)多用于焦慮或抑郁情緒的評(píng)價(jià)。人們?cè)噲D運(yùn)用活動(dòng)性和排便來評(píng)價(jià)動(dòng)物行為。然而由于藥物可以通過與焦慮無關(guān)的機(jī)制改變動(dòng)物活動(dòng)，因此運(yùn)動(dòng)活性不適合做為焦慮指標(biāo)。開場(chǎng)排便發(fā)生率與動(dòng)物情緒有關(guān)，但受食物攝入量、胃腸蠕動(dòng)等無關(guān)因素影響，因此做為焦慮指標(biāo)并不使人滿意。為建立一個(gè)較為理想的曠場(chǎng)焦慮模型，行為藥理學(xué)家Stenfanski等（1992）和Stout等（1994）分別對(duì)曠場(chǎng)進(jìn)行改進(jìn)。

Stenfanski等使用的傳統(tǒng)的圓形曠場(chǎng)。直徑80cm，高30cm。曠場(chǎng)底部*劃有直徑分別為35cm和50cm的內(nèi)、外兩個(gè)圓圈，內(nèi)圈所包含的區(qū)域?yàn)?區(qū)；靠近底部的側(cè)壁上對(duì)稱裝有3個(gè)光電管，并可通過攝像頭觀察大鼠的活動(dòng)情況。整個(gè)實(shí)驗(yàn)在弱光環(huán)境、65dB的白噪音（背景聲）條件下進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)多用雄性Wistar大鼠，體重200-240g。將大鼠置于曠場(chǎng)*，觀察10min內(nèi)大鼠的總活動(dòng)計(jì)數(shù)、進(jìn)入曠場(chǎng)外圈的次數(shù)和曠場(chǎng)*區(qū)停留時(shí)間。

Stout-Weiss法又叫曠場(chǎng)飲水實(shí)驗(yàn)（the open field drink test,OFDT）：這是Stout和Weiss根據(jù)Britton的曠場(chǎng)攝食實(shí)驗(yàn)改進(jìn)而成。曠場(chǎng)攝食實(shí)驗(yàn)雖然可以用來評(píng)價(jià)藥物的抗焦慮作用，但是很多藥物本身會(huì)影響攝食，從而導(dǎo)致藥物的作用是改變焦慮狀態(tài)還是影響食欲很難區(qū)分。因此Stout和Weiss把攝食改為飲水了，再通過改進(jìn)實(shí)驗(yàn)裝置和控制實(shí)驗(yàn)條件使OFDT能成功區(qū)分抗焦慮劑和致焦慮劑。實(shí)驗(yàn)用36cm*36cm*36cm的透明有機(jī)玻璃箱，底部為黑色，頂部敞開。箱子的*倒置懸掛一個(gè)動(dòng)物飲水瓶，瓶嘴離地面10cm（大鼠使適用）。箱子正上方60cm處安裝一個(gè)25w的白熾燈照明。除一面外其余三面用黑色擋板遮擋，借以排除額外可見光源刺激。實(shí)驗(yàn)前三天每天僅給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（大鼠）飲水一個(gè)小時(shí)（下午3－4點(diǎn)鐘），實(shí)驗(yàn)前3天每天至少撫摸動(dòng)物1min，借以減少非特異性應(yīng)激刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響。實(shí)驗(yàn)時(shí)，將大鼠放于曠場(chǎng)*部，記錄10min內(nèi)大鼠的以下指標(biāo)：開始飲水的潛伏期，飲水時(shí)間，靠近水瓶的次數(shù)以及站立次數(shù)。

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)儀器

大鼠常用的曠場(chǎng)為1.2m×1.2m 、1m×1m和50cm×50cm多種規(guī)格，側(cè)壁高40 cm，底板為黑色和四壁可為白色或黑色，上部敞開。曠場(chǎng)上方安置攝像頭記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在曠場(chǎng)中的活動(dòng)情況。

實(shí)驗(yàn)方法

• 實(shí)驗(yàn)開始之前先將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物暴露在95 dB的白噪音中1小時(shí)，然后立即放入曠場(chǎng)中。
• 記錄5 min內(nèi)大鼠在曠場(chǎng)中的活動(dòng)情況，包括水平活動(dòng)情況和垂直方向活動(dòng)情況（直立次數(shù)）以及糞便情況。
• 每只大鼠實(shí)驗(yàn)記錄結(jié)束，不僅要擦干凈其糞便及尿液，還需用5%的乙酸水溶液*清潔曠場(chǎng)，再用紙巾或干布擦干。

記錄數(shù)據(jù)

• 水平運(yùn)動(dòng)總距離――――反應(yīng)大鼠的運(yùn)動(dòng)情況。例如抑郁大鼠水平運(yùn)動(dòng)距離將大大減少，多躲避于曠場(chǎng)一角不動(dòng)。
• *區(qū)運(yùn)進(jìn)入總次數(shù)――――反應(yīng)大鼠的焦慮情況?？菇箲]藥物可以在不改變一般運(yùn)動(dòng)情況的前提下增加大鼠的*區(qū)進(jìn)入次數(shù)。抑郁大鼠*區(qū)進(jìn)入次數(shù)也會(huì)大幅度下降。
• *區(qū)運(yùn)滯留時(shí)間――――反應(yīng)大鼠的焦慮情況。抗焦慮藥物可以在不改變一般運(yùn)動(dòng)情況的前提下增加大鼠的*區(qū)滯留時(shí)間。抑郁大鼠*區(qū)滯留時(shí)間也會(huì)大幅度下降。
• 直立次數(shù)――――反應(yīng)大鼠垂直水平活動(dòng)情況，主要反應(yīng)大鼠的探究行為。抑郁大鼠對(duì)外界環(huán)境的好奇性或探究興趣下降，所以表現(xiàn)出直立次數(shù)顯著下降。
• 糞便數(shù)量――――反應(yīng)大鼠的焦慮情況。但是由于糞便數(shù)受影響因素多并不能充分反映出大鼠的焦慮情況。

注意事項(xiàng)

• 實(shí)驗(yàn)前需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每天撫摸1-2min以減少非特異性應(yīng)激刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)中的影響。
• 實(shí)驗(yàn)過程中需要弱光照明，觀察者盡量與測(cè)試動(dòng)物分隔。
• 實(shí)驗(yàn)過程中需要環(huán)境安靜。
• 進(jìn)行曠場(chǎng)檢測(cè)時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行篩選，有些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在正常情況下水平方向或垂直方向的活動(dòng)情況顯著低于同批動(dòng)物平均水平，則需要將這些動(dòng)物預(yù)先剔除。