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更新時(shí)間:2023-12-25 19:32:07瀏覽次數(shù):515評(píng)價(jià)
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貨號(hào) | BK-01S6732 |
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特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng):麥芽糖含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6732
產(chǎn)品分類(lèi):糖代謝系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 麥芽糖是由兩個(gè)葡萄糖單位經(jīng)由α-1,4糖苷鍵連接而成的二糖,又稱(chēng)麥芽二糖。麥芽糖是淀粉、糖原、糊精等大分子多糖類(lèi)物質(zhì)在β-催化下的主要水解產(chǎn)物,再經(jīng)麥芽糖酶催化,則被水解成兩個(gè)葡萄糖分子。麥芽糖不僅參與了生物體內(nèi)糖代謝,其在食品和醫(yī)藥工業(yè)等行業(yè)也著廣泛應(yīng)用,是產(chǎn)品質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一。 測(cè)定原理: 麥芽糖酶將樣品中麥芽糖水解為葡萄糖; 葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過(guò)氧化氫;過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫氧化4-氨基偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水 |
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
50T 傷寒桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1 mg NS-2028(sGC抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
50mL Ferrous Sulfate Solution(硫酸鐵溶液),0.5M Ferrous Sulfate Solution,0.5M 常溫保存
1張 硝酸纖維素膜,13×20 cm(Tiandz) Nitrocellulose Membrane 常溫
2 ug pIRES-neo3 pIRES-neo3 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
劉榮標(biāo)氏鞭毛染色液 5ml*8
1瓶 LNCaP細(xì)胞株 LNCaP 低溫運(yùn)輸和保存
標(biāo)準(zhǔn)I號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂 Standard I Nutrient Agar 250g
2.5KU 己糖激 Hexokinase 4℃保存
250mL Sucrose in MNE Buffer,80% Sucrose in MNE Buffer,80% 常溫保存
50mL 藍(lán)膠瓊脂糖 Cibacron Blue Agarose 4℃保存
麥芽糖含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法NCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3 類(lèi)固醇受體激活蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
GKRP 葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
MIG6/ERRFI1 有絲分裂原誘導(dǎo)基因6抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD44/HCAM/PGP1 CD44抗體 規(guī)格: 0.1mlKeratan Sulfate 硫酸角質(zhì)素抗體 規(guī)格: 0.2ml
DIP2A/C21orf106 21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框106抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-Bov IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
Mtp53(N235K N239Y) 突變型P53抗體 規(guī)格: 0.1mlSCD1 固醇酰輔A脫1抗體 規(guī)格: 0.1ml
DNMBP 動(dòng)力結(jié)合蛋白DNMBP抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-Ret/HSCR1(Tyr1062) 磷酸化原基因酪蛋白激受體RET抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-Nrf2 (Ser40) 磷酸化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體 規(guī)格: 0.1mlCrk p38 /CRK Crk p38抗體 規(guī)格: 0.2ml
HPV18 E6 人類(lèi)狀瘤毒18 E6抗體 規(guī)格: 0.2mlGPR71/T1R2 蛋白偶聯(lián)受體71抗體 規(guī)格: 0.2ml
MMP-10 基質(zhì)金屬蛋白-10抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-FAK(Tyr861) 磷酸化粘著斑激抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-EGFR (Ser1026) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1mlCD13/APN/ANPEN CD13氨肽N抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1mlPhospho-IRAK1 (Ser376) 磷酸化白介素-1受體相關(guān)激1抗體 規(guī)格: 0.1ml
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
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