樣品實驗方案

簡要概述

1.MAO標(biāo)準(zhǔn)品或測試樣品（50μL）
2.添加MAO工作溶液（50μL）
3.在室溫下孵育30-60分鐘
4.在Ex / Em = 540/590 nm處讀取熒光強度（截止570 nm）

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite 紅色儲備液（250X）：
將40μLDMSO（組分F）加入到Amplite TM Red底物（組分A）的小瓶中。應(yīng)立即使用原液。注意：在硫醇如二硫蘇糖醇（DTT）和2-巰基y醇存在下，Amplite Red底物不穩(wěn)定。反應(yīng)中DTT或2-巰基y醇的終濃度應(yīng)不高于10μM。 Amplite Red底物在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應(yīng)應(yīng)在pH7-8下進行。推薦使用所提供的測定緩沖液，pH7.4。

2. HRP解決方案（200X）：
將100μL測定緩沖液（組分B）加入到辣根過氧化物酶（組分C）的小瓶中。

3.血漿胺氧化酶（PAO）標(biāo)準(zhǔn)溶液（20 U / mL）：
將125μL測定緩沖液（組分B）加入等離子體胺氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品（組分E）的小瓶中。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

谷an酸氧化酶標(biāo)準(zhǔn)
將30μL150mU/ mL GO標(biāo)準(zhǔn)溶液加入420μL測定緩沖液（組分B）中，得到10mU / mL GO標(biāo)準(zhǔn)溶液（GO7）。 取10 mU / mL GO標(biāo)準(zhǔn)溶液進行1：3連續(xù)稀釋，得到剩余的連續(xù)稀釋的GO標(biāo)準(zhǔn)品（GO6-GO1）。

3.工作溶液

將20μLDelterite Red原液（250X），25μLHRP儲備液（200X）和25μLMAO底物（組分D）加入5 mL分析緩沖液（組分B）中，使總體積為5.07 mL 單胺氧化酶（MAO）工作溶液,避光。