Amplite 熒光法L-天門冬an酸檢測試劑盒是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于檢測天門冬an酸的試劑盒，天冬氨酸（或天冬氨酸）是帶負電荷的極性氨基酸。 天冬氨酸參與嘧啶生物合成的控制點，轉(zhuǎn)氨反應(yīng)，與天冬酰胺的相互轉(zhuǎn)化，在尿素循環(huán)中導致AMP的代謝途徑中，并且是高絲an酸，蘇an酸，異亮an酸和甲硫an酸的前體。 它也參與蘋果酸天冬氨酸穿梭。 Amplite 熒光天冬氨酸測定試劑盒為生物樣品中天冬氨酸的定量分析提供了靈敏的熒光分析方法。 天冬氨酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸，通過酶偶聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生過氧化氫。 用Amplite Red底物監(jiān)測由天冬氨酸產(chǎn)生的過氧化氫的量，用Ex / Em = 540 / 590nm處的熒光酶標儀定量天冬氨酸。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 熒光法L-天門冬an酸檢測試劑盒。

樣品實驗方案

簡要概述

1.準備測試樣品以及稀釋的天冬氨酸標準品（50 µL）
2.加入等體積的工作溶液（50 µL）
3.在37°C下孵育20-30分鐘
4.監(jiān)測Ex / Em = 540/590 nm的熒光強度

溶液制備

1.儲備溶液

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環(huán)。
1.1 天冬氨酸標準溶液（10 mM）：
將100 uL ddH2O加入天冬氨酸標準樣品瓶（組分E）中，制成10 mM天冬氨酸標準溶液。

1.2 Amplite Red底物儲備液（200X）：
向Amplite Red底物（組分A）中加入50 µL DMSO（組分F），制成200X Amplite Red底物原液。

2.標準溶液

天冬氨酸標準
向990 µL 1X PBS緩沖液中加入10 µL 10 mM天冬氨酸標準液，得到100 µM天冬氨酸溶液（ASP7）。然后在1X PBS緩沖液中進行1：3的系列稀釋，以得到系列稀釋的天冬氨酸標準品（ASP6-ASP1）。

3.工作溶液

3.1 Conversion Mix（100X）：
將50 µL ddH2O加入轉(zhuǎn)化混合液（組分D）中，制成100X轉(zhuǎn)化混合儲備液。

3.2 Amplite Red：
將5 mL分析緩沖液（組分C）加入一瓶酶混合液1瓶（組分B1）中； 混合均勻。 將100μLddH2O加入一個酶混合物2小瓶中（組分B2）; 混合均勻。 將整個小瓶（100μL）的酶混合液2、25μL的200X Amplite Red底物儲備液和50μL的100X Conversion Mix溶液轉(zhuǎn)移到Enzyme Mix 1瓶中并充分混合。 注意：工作溶液不穩(wěn)定，請立即使用，并避免直接暴露在光線下。