用于染色細胞的樣品方案

以下程序適用于大多數(shù)細胞類型。 生長培養(yǎng)基，細胞密度，其他細胞類型的存在和其他因素可能影響B(tài)rdu摻入。

1）制備1-10mM DMSO儲備溶液。 如果儲存在-20°C，DMSO儲備液可以保存6個月。

2）通過離心沉淀細胞并將細胞重懸于生長培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)物中的貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養(yǎng)孔中原位染色。

3）使用5和20μM之間的濃度添加Brdu染色并孵育60分鐘過夜作為指導(dǎo)。 孵育時間取決于細胞類型和實驗?zāi)繕恕?/span>

4）用70-80％酒精或酸 - 乙醇固定細胞20-30分鐘。

5）用PBS洗滌（3次，每次2分鐘）。

6）繼續(xù)進行免疫細胞化學(xué)染色技術(shù)。