樣品實驗方案

簡要概述

1.準(zhǔn)備樣品
2.從培養(yǎng)箱中取出細(xì)胞板
3.添加10X Track It Blue工作溶液（10 µL /孔）
4.將細(xì)胞在室溫下染色15至60分鐘
5.清洗細(xì)胞
6.在熒光顯微鏡下用DAPI濾光片或流式細(xì)胞儀在Ex / Em = 360/445 nm下檢查標(biāo)本

溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應(yīng)分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復(fù)凍融循環(huán)。
1. Track It 藍(lán)色儲備溶液（2mM）：
將25 µL DMSO（組分B）添加到一小瓶Track It Blue（組分A）中，并充分混合以制成2mM Track It Blue儲備液。

2.工作溶液配制

將2 mM Track It Blue儲備溶液稀釋到測定緩沖液（組分C）中，制成5至50μMTrack It Blue工作溶液。 Track It Blue工作溶液應(yīng)以適當(dāng)?shù)臐舛葹?0μL/孔的所有孔準(zhǔn)備足夠。 例如，要獲得一塊96孔微孔板濃度為20μM的Track It Blue，可將10μLTrack It Blue儲備液稀釋到1 mL的測定緩沖液（組分C）中，制成1 mL的20 μM（10倍）Track It Blue工作解決方案。 注意：對于不同的細(xì)胞類型和/或?qū)嶒灄l件，應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗確定Track It Blue的濃度。 建議以至少十倍以上的濃度進(jìn)行測試。 注意：我們發(fā)現(xiàn)孔濃度為2 uM對于大多數(shù)細(xì)胞系而言已足夠。

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樣品示例及操作

圖1.在Costar黑色墻壁/透明底部96孔板上用Cell Explorer活細(xì)胞跟蹤試劑盒染色的HeLa細(xì)胞圖像。