天根-石蠟包埋組織切片-總RNA提取試劑盒-DP439

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒可從福爾馬林固定石蠟包埋組織切片(以下簡(jiǎn)稱 FFPE)中提取總RNA 。由于固定和包埋的條件限制， FFPE樣本核酸通常發(fā)生片段化并且會(huì)被甲醛化學(xué)修飾，因此較難提取，本試劑盒提取的 RNA 可應(yīng)用于 RT-PCR 等下游試驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

■ 采用硅基質(zhì)膜柱法純化方式，在可能的程度內(nèi)獲得的總RNA 純度更高、信息更為完整。

■ 相對(duì)于傳統(tǒng)方法，操作更為簡(jiǎn)便、快捷。

■ 適用于下游的RT-PCR 或RT-qPCR 等實(shí)驗(yàn)檢測(cè)。

產(chǎn)品應(yīng)用：

本品適用于從福爾馬林固定石蠟包埋組織切片( 簡(jiǎn)稱FFPE) 中提取總RNA。

實(shí)驗(yàn)例

使用前注意事項(xiàng): 

1. 次使用前應(yīng)在漂洗液RW中加入無(wú)水乙醇，加入量請(qǐng)參見(jiàn)瓶上標(biāo)簽。

2. DNase I儲(chǔ)存液的配制 將DNase I干粉（1500 U）溶解在550 μl RNase-Free ddH2O中，輕柔混勻，分裝后-20℃ 貯存（可保存9個(gè)月）。 注意：從-20℃融化后的DNase I儲(chǔ)存液保存于4℃（可保存6周），不要再次凍存。

 起始材料 1. 標(biāo)準(zhǔn)的福爾馬林固定石蠟包埋程序也常常會(huì)造成核酸的片段化。為

了盡量降低RNA片段化的可能性,應(yīng)該按照以下操作步驟進(jìn)行樣本處理：

● 組織切除后應(yīng)盡快浸入4%-10%的福爾馬林溶液中； 

● 固定時(shí)間為14-24 h(固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致RNA片段化更嚴(yán)重,不利于下游的試驗(yàn)；

● 樣本包被之前必須脫水。 

1. 應(yīng)采用新鮮的FFPE組織切片,切片厚度不超過(guò)10 μm，切片過(guò)厚可能會(huì)造成RNA得率低， 每次制備采用的切片數(shù)應(yīng)不超過(guò)8片，表面積應(yīng)不超過(guò)250 mm2 。

2. 如果沒(méi)有起始樣本的信息，建議初次制備采用的切片數(shù)應(yīng)不超過(guò)2片，然后根據(jù)RNA的得 率和純度，下次制備采用的切片數(shù)可以進(jìn)行調(diào)整，但應(yīng)不超過(guò)8片。