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聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線FV3000系列激光掃描共聚焦顯微鏡能夠解決一些現(xiàn)代科學(xué)艱巨的挑戰(zhàn)
FV3000系列激光掃描共聚焦顯微鏡能夠解決一些現(xiàn)代科學(xué)艱巨的挑戰(zhàn)。FV3000共聚焦顯微鏡具有活細(xì)胞成像和深層組織觀察所需的高靈敏度和高速度,能夠?qū)崿F(xiàn)包括從宏觀到微觀成像、超分辨率顯微觀察和定量數(shù)據(jù)分析在內(nèi)的多種成像方式。在正置式和倒置式顯微鏡鏡架之間選擇適合包括發(fā)育生物學(xué)、干細(xì)胞研究、電生理、腫瘤研究、載玻片成像等在內(nèi)的多種生命科學(xué)應(yīng)用的一款。
采用的光譜檢測(cè)技術(shù)的FV3000共聚焦顯微鏡的TruSpectral全真光譜檢測(cè)器將高靈敏度與光譜靈活性集于一體,可以檢測(cè)微弱的熒光團(tuán)。
透光率是傳統(tǒng)光譜檢測(cè)技術(shù)的三倍
可獨(dú)立調(diào)整的通道能夠優(yōu)化每個(gè)熒光團(tuán)的信號(hào)檢測(cè)
λ掃描模式可對(duì)復(fù)雜重疊熒光信號(hào)進(jìn)行準(zhǔn)確的光譜拆分
濾色片(VBF)模式可同時(shí)進(jìn)行四通道圖像采集,在虛擬通道模式下最多可進(jìn)行十六通道的熒光采集
FV3000顯微鏡的從宏觀到微觀工作流程提供了數(shù)據(jù)采集路線圖,讓您能夠在背景中查看數(shù)據(jù)并輕松定位感興趣區(qū)域進(jìn)行高分辨率成像。
使用低倍率1.25倍或2倍物鏡快速拍攝整體標(biāo)本的大視場(chǎng)(FOV)圖像
在拼接圖像上找到感興趣的區(qū)域,然后利用奧林巴斯超高分辨率技術(shù)(FV-OSR)切換到更高放大倍率物鏡進(jìn)行低至120納米的高分辨率共聚焦成像
通過(guò)TruSight圖像處理完成采集,并獲得可隨時(shí)發(fā)布的顯微圖像
半個(gè)冠狀小鼠腦片在顯微鏡下拍攝的圖,二抗標(biāo)記的是GFP(Alexa Fluor 488,綠色)、SV2(Alexa Fluor 565,紅色)、Homer(Alexa Fluor 647,藍(lán)色)。
樹突(Anti-GFP抗體 Alexa Fluor 488,綠色)和突觸標(biāo)記(SV2,Alexa Fluor 565,紅色)。利用cellSensCI反卷積功能處理的奧林巴斯超級(jí)分辨率圖像。測(cè)量獲得半波峰寬約為135nm。使用100X 1.35 NA硅油物鏡獲取的圖像。
FV3000混合掃描單元將兩套掃描振鏡合二為一,提升共焦成像功能。
FV3000RS混合掃描單元利用常規(guī)掃描振鏡用于高精度掃描,同時(shí)有共振掃描振鏡對(duì)實(shí)時(shí)生理現(xiàn)象進(jìn)行高速成像
使用共振掃描振鏡以大視場(chǎng)捕獲視頻速率的圖像,速度可從全視場(chǎng)FN 18的每秒30幀/秒,一實(shí)現(xiàn)每秒438幀/秒(fps)
使用共振掃描振鏡觀察諸如心臟跳動(dòng)、血液流動(dòng)或細(xì)胞鈣離子(Ca2 +)動(dòng)態(tài)等快速現(xiàn)象
一鍵切換高精度的常規(guī)掃描振鏡和高速度的共振掃描振鏡
時(shí)間序列成像實(shí)驗(yàn)需要對(duì)樣品進(jìn)行持續(xù)聚焦以及低光毒性。
奧林巴斯的TruFocus模塊即便溫度變化或添加試劑也可確保在活細(xì)胞成像過(guò)程中保持在焦
FV3000顯微鏡的高靈敏度檢測(cè)器所要求的激光功率大幅度降低,配合共振振鏡減少每個(gè)點(diǎn)的曝光時(shí)間,從而在減少更多光毒性的同時(shí)得到更精確的圖像數(shù)據(jù)
硅油的折射率接近于活組織的折射率,因此能夠以小球差進(jìn)行活組織內(nèi)部的深度高分辨率觀察。
折射率匹配提供了更準(zhǔn)確的聚焦,實(shí)現(xiàn)了大體積生物體的高還原度的三維重構(gòu)和高分辨率共聚焦成像
長(zhǎng)工作距離可實(shí)現(xiàn)深層的顯微成像
實(shí)時(shí)查看數(shù)據(jù),并使用3D重構(gòu)軟件輕松觀察結(jié)構(gòu)
與上一代的光譜檢測(cè)單元相比, TruSpectral全真光譜檢測(cè)技術(shù)能夠呈現(xiàn)更為出色的結(jié)果。FV3000顯微鏡各通道均采用了將光譜檢測(cè)器的靈活性與基于濾色片的靈敏度相結(jié)合的TruSpectral全真光譜檢測(cè)技術(shù)。
基于高效率的技術(shù)體相位全息(VPH)透射光柵,TruSpectal全真光譜檢測(cè)技術(shù)配合可調(diào)狹縫可實(shí)現(xiàn)2nm的光譜檢測(cè)。
與傳統(tǒng)光譜檢測(cè)單元相比, FV3000系列共聚焦顯微鏡均配備的TruSpectral全真光譜檢測(cè)技術(shù)實(shí)現(xiàn)更高的光通量。體相位全息透射光柵能夠以比反射光柵高三倍的透射效率來(lái)衍射光線。由此最終獲得出色的活組織和固定組織多色熒光顯微圖像。
FV3000顯微鏡的高靈敏度檢測(cè)器(HSD)讓您能夠采集到常規(guī)檢測(cè)器無(wú)法檢測(cè)到的微弱熒光信號(hào)。HSD單元采用兩個(gè)量子效率45%的GaAsP檢測(cè)器,并通過(guò)Pilter固體制冷技術(shù)在極低激發(fā)光下將圖像背景噪聲降低20%。HSD單元可配合FV3000系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)四通道GaAsP成像。
TruSpectral全真光譜檢測(cè)可在所有顯微鏡通道上獨(dú)立工作,因此能夠在多達(dá)四個(gè)通道上實(shí)現(xiàn)真正的多通道同時(shí)λ掃描。多通道λ模式有助于實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)和實(shí)驗(yàn)后處理光譜拆分由此獲得出色的光譜分離結(jié)果。在多達(dá)四個(gè)動(dòng)態(tài)范圍的條件下,可單獨(dú)調(diào)節(jié)每個(gè)檢測(cè)器的靈敏度實(shí)現(xiàn)明亮和暗淡信號(hào)的分離。
原始信號(hào)
各通道的靈敏度調(diào)整
光譜拆分
FV3000系統(tǒng)的光譜反卷積算法讓重疊光譜能夠基于來(lái)自λ序列圖像的光譜信息進(jìn)行分離。在實(shí)時(shí)圖像采集和采集后處理過(guò)程中,可以通過(guò)拆分算法消除通道之間的熒光串?dāng)_,從而清晰分離多達(dá)16個(gè)熒光信號(hào)。
可在兩種掃描單元之間選擇:常規(guī)掃描振鏡(FV3000)或混合的常規(guī)/共振掃描振鏡(FV3000RS)。
利用常規(guī)掃描振鏡和奧林巴斯超分辨率技術(shù)(FV-OSR)以高信噪比獲得低至120納米分辨率的圖像
常規(guī)振鏡掃描單元可提供精準(zhǔn)的龍卷風(fēng)掃描模式和多點(diǎn)刺激功能,而且刺激與成像切換僅需100ms
混合式掃描單元既配有用于高精度掃描的常規(guī)掃描振鏡,也配有用于高速成像的共振掃描振鏡
共振掃描振鏡讓您能夠以512×512像素全視場(chǎng)每秒捕捉30幀圖像,或者通過(guò)剪切Y軸以每秒438幀速度捕獲關(guān)鍵的實(shí)時(shí)生物電生理現(xiàn)象,如鈣離子信號(hào)的檢測(cè)。
很多高速掃描方法受制于成像視野,從而限制了檢查多細(xì)胞大視野的能力。FV3000RS顯微鏡的共振掃描振鏡即便在每秒30幀的視頻速率下也可能保持FN 18的全視場(chǎng)成像,可實(shí)現(xiàn)每秒438幀采樣。
低激光功率高速掃描盡管可以大限度降低光毒性,但往往會(huì)降低信噪比,從而難以獲得高分辨率的時(shí)間序列圖像。通過(guò)循環(huán)平均化降噪處理,您不但可以調(diào)整快速延時(shí)圖像獲得更高的信噪比,同時(shí)還可保持時(shí)間分辨率并保留原始數(shù)據(jù)。
(左)以低激光功率(0.05%,488nm)采集的原始30 fps數(shù)據(jù)。
(右)以低激光功率采集的30 fps數(shù)據(jù)進(jìn)行了循環(huán)平均化降噪處理(10幀)。
以從宏觀到微觀的觀察方式查看數(shù)據(jù)。使用FV3000系統(tǒng)經(jīng)過(guò)重新設(shè)計(jì)的光路,可生成低至1.25倍的詳細(xì)概覽圖像,然后即可輕松將所觀察的結(jié)構(gòu)以更高倍率成像。圖像拼接可以讓您采集相鄰視場(chǎng)的連續(xù)3D(XYZ)和4D(XYZT)圖像。從圖像采集到拼接的全過(guò)程可自動(dòng)化,由此節(jié)省時(shí)間并生成更多重要數(shù)據(jù)。
利用TruSight反卷積消除模糊并獲得更清晰、更銳利的圖像。FV3000共焦顯微鏡的專用cellSens算法可通過(guò)一鍵點(diǎn)擊完成從采集到處理的無(wú)縫工作流程,并通過(guò)GPU處理更快地得到結(jié)果。
GATTA-SIM納米尺的圖像
左圖:原始共聚焦圖像/右圖:使用TruSight獲得的圖像
適用于共定位分析的奧林巴斯超分辨率成像模塊可以依次或同時(shí)以120納米的分辨率采集四個(gè)熒光信號(hào),分辨率幾乎是傳統(tǒng)奧林巴斯共焦顯微鏡的兩倍。
不需要特殊的熒光團(tuán),并且可處理各種樣品
只需很少的培訓(xùn)即可輕松上手
為FV3000共焦顯微鏡系統(tǒng)添加FV-OSR即可獲得超分辨率顯微鏡
0.5AU共聚焦圖像
使用cellSens高級(jí)反卷積的0.5AU共聚焦圖像
奧林巴斯超分辨OSR圖像,可清晰區(qū)分點(diǎn)狀染色
TruFocus技術(shù)讓多點(diǎn)實(shí)驗(yàn)和長(zhǎng)時(shí)程成像更加穩(wěn)定可靠。TruFocus技術(shù)使用一種具有低光毒性的紅外激光(1類)識(shí)別樣品平面位置,并提供兩種模式保持聚焦。
一鍵自動(dòng)聚焦(AF)模式可讓您設(shè)置多個(gè)聚焦位置,從而在多點(diǎn)實(shí)驗(yàn)中實(shí)現(xiàn)高效的Z序列采集
連續(xù)鎖焦模式可保持相應(yīng)觀察平面精確聚焦,并避免由于溫度變化或添加試劑而導(dǎo)致的焦點(diǎn)漂移,因此成為時(shí)間序列定量實(shí)驗(yàn)的理想選擇
TruFocus可兼容包括空氣物鏡、塑料培養(yǎng)皿和硅油物鏡在內(nèi)的多種共聚焦實(shí)驗(yàn)條件
X Line物鏡可提供寬范圍色差校正、均勻的圖像和更高的數(shù)值孔徑,由此提高FV3000共聚焦顯微鏡的成像質(zhì)量。
左:常規(guī)物鏡/右:X Line物鏡
奧林巴斯提供四款高數(shù)值孔徑硅油浸物鏡,使活細(xì)胞成像獲得的效果。
硅油的折射率(ne≈1.40)接近于活組織的折射率(ne≈1.38),因此能夠以小球差進(jìn)行深層的活組織內(nèi)部的高分辨率觀察。
硅油不會(huì)變干或硬化,因此在長(zhǎng)時(shí)間觀察過(guò)程中無(wú)需重新加油
這款油浸物鏡可大限度減少405-650nm光譜波段橫向和軸向色差,使您能夠獲取可靠的共定位圖像并進(jìn)行超高定位精度的測(cè)量。物鏡對(duì)近紅外線區(qū)域達(dá)850nm波長(zhǎng)進(jìn)行色差校正,使之成為定量觀察成像的理想選擇。
倍率: 60X
NA數(shù)值孔徑: 1.4(油浸)
WD工作距離: 0.12毫米
色差校正范圍:405–650nm
為每個(gè)物鏡提供光學(xué)數(shù)據(jù)
PLAPON60XOSC2
通過(guò)觸發(fā)信號(hào)I / O接口控制盒將共聚焦成像與電生理設(shè)備同步。I / O接口控制盒還可將電壓信號(hào)轉(zhuǎn)換為能夠以與熒光圖像相同方式進(jìn)行處理的圖像??奢p松實(shí)現(xiàn)在光刺激的同時(shí)利用共聚焦掃描記錄電壓信號(hào)圖像的功能。
FV3000軟件簡(jiǎn)化了從采集到分析的整個(gè)共聚焦成像及分析工作流程。可定制且可保存的布局設(shè)置讓您無(wú)論復(fù)雜程度如何,均可輕松根據(jù)工作流程和實(shí)驗(yàn)需求自定義界面。
利用FV3000軟件的實(shí)時(shí)3D圖像渲染功能并實(shí)時(shí)查看您的數(shù)據(jù)。3D圖像可在圖像采集期間進(jìn)行構(gòu)建并以實(shí)時(shí)圖像方式顯示。
選配NoviSight軟件可以執(zhí)行3D細(xì)胞分析。該軟件特別適合多孔多細(xì)胞球等標(biāo)本在3D范圍內(nèi)進(jìn)行復(fù)雜的量化分析。
多位點(diǎn)延時(shí)和微孔板成像多位點(diǎn)延時(shí)(MATL)模塊通過(guò)對(duì)電動(dòng)載物臺(tái)移動(dòng)的精確控制獲得強(qiáng)大而準(zhǔn)確的時(shí)間序列數(shù)據(jù),讓您能夠生成方便查看相關(guān)數(shù)據(jù)的細(xì)節(jié)概覽顯微圖像。將MATL模塊與多孔板導(dǎo)航器模塊配合使用,可利用不同細(xì)胞培養(yǎng)容器和定制微孔板的精密直觀的控制實(shí)現(xiàn)更多功能。 |
---|
時(shí)序管理器軟件模塊可輕松處理復(fù)雜的科學(xué)實(shí)驗(yàn)。多天時(shí)間序列實(shí)驗(yàn)以微秒級(jí)掃描精度和毫秒級(jí)序列執(zhí)行精度進(jìn)行控制??蓤?zhí)行各種復(fù)雜實(shí)驗(yàn)方案,其中包括:
在高低倍率物鏡之間切換
不同間隔的時(shí)間序列成像
FRAP或FRET(受體漂白法)成像過(guò)程中進(jìn)行光刺激
FV3000共聚焦顯微鏡可增加一套可選配的分析功能來(lái)完成成像工作流程并提供定量數(shù)據(jù)。
計(jì)數(shù)和測(cè)量:計(jì)算細(xì)胞的數(shù)量、大小、光強(qiáng)和形態(tài)
共定位:分析重疊熒光光譜
計(jì)數(shù)和測(cè)量 共定位
FV3000顯微鏡與cellSens生命科學(xué)分析模塊配合使用,可輕松獲取及分析FRET和FRAP實(shí)驗(yàn)。
在FRAP實(shí)驗(yàn)中,τ/ 2和移動(dòng)/靜止部分,可以通過(guò)擬合漂白后熒光恢復(fù)引起的亮度變化曲線來(lái)進(jìn)行估算。
FRET效率的測(cè)量可以通過(guò)受體漂白法、比例成像法和敏化發(fā)射法來(lái)實(shí)現(xiàn)。
FRET分析示例(受體光漂白) FRAP分析示例 比例成像和強(qiáng)度調(diào)節(jié)顯示(IMD)FV3000的比例成像分析軟件具有強(qiáng)度調(diào)節(jié)顯示(IMD)功能,在標(biāo)準(zhǔn)速度或高速采集時(shí),實(shí)時(shí)顯示熒光定量比例圖像的變化過(guò)程。該功能對(duì)于測(cè)鈣和FRET成像特別有用,可以增強(qiáng)信號(hào)對(duì)比度。 CCCP處理前后 ela 細(xì)胞中tsGFP1-mito表達(dá)量的變化體現(xiàn)線粒體產(chǎn)熱過(guò)程的蛋白質(zhì)變化。 |
左:原始CFP/YFP比值 右:CFP/YFP比值的IMD
使用cellSens目標(biāo)追蹤模塊自動(dòng)檢測(cè)、追蹤和分析延時(shí)圖像中的運(yùn)動(dòng)對(duì)象。追蹤功能提供了強(qiáng)大直觀的工具來(lái)量化諸如細(xì)胞移動(dòng)和分裂等動(dòng)態(tài)過(guò)程。
遠(yuǎn)程開發(fā)模塊可使用Python、C ++和Matlab等語(yǔ)言對(duì)特定FV3000顯微鏡功能進(jìn)行遠(yuǎn)程控制和編程。RDK模塊能夠發(fā)揮系統(tǒng)所蘊(yùn)含的更大潛力,是具有編程經(jīng)驗(yàn)用戶的強(qiáng)大工具。
FV3000 | FV3000RS | ||
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主激光耦合器 | 紫外/可見(jiàn)光激光 | 405nm:50mW,488nm:20mW,561nm:20mW,640nm:40mW | |
選配激光 | 副激光耦合器 | 445nm:75mW,514nm:40mW,594nm:20mW | |
近紅外激光器 | 可選配730nm/785nm/808nm/980nm 等單譜線近紅外激光器 | ||
激光控制 | 內(nèi)置AOTF系統(tǒng),具備光閘開關(guān)功能,可快速切換激光并調(diào)制各個(gè)激光強(qiáng)度連續(xù)可調(diào),調(diào)節(jié)范圍0.1%-99%,最小步進(jìn)0.01% 激光強(qiáng)度連續(xù)可調(diào),調(diào)節(jié)范圍0.1%-99%,最小步進(jìn)0.01% | ||
掃描單元 | 掃描方法 | 2個(gè)鍍銀Galvo掃描振鏡振鏡 | 2個(gè)鍍銀Galvo掃描振鏡振鏡 1個(gè)鍍銀共振和1個(gè)鍍銀Galvo振鏡掃描 |
常規(guī)掃描振鏡 (常規(guī)成像) | 掃描分辨率:64×64至4096×4096 掃描速度:512X512 16幀/秒(雙向掃描),256X256 62幀/秒 (雙向掃描) 線掃速度:4000線/秒 光學(xué)變倍:1X–50X,0.01X步進(jìn) 旋轉(zhuǎn)掃描:360°自由旋轉(zhuǎn),步進(jìn)0.1° 掃描模式:PT,XT,XZ,XY,XZT,XYT,XYZ,XYλ,XYZT,XYλT,XYλZ,XYλZT ROI掃描、矩形裁剪、橢圓、多邊形、自由區(qū)域、直線、自由直線和點(diǎn),用于光刺激的龍卷風(fēng)模式 | ||
共振掃描振鏡 (高速成像) | - | 掃描分辨率:512×32至512×512 掃描速度:512X 512 30幀/秒 @ FN 18,512X32 438幀/秒 線掃速度:15800線/秒 光學(xué)變倍:1-8X,0.01X步進(jìn) 掃描模式:XT,XZ,XY,XZT,XYT,XYZ,XYλ,XYZT,XYλT,XYZ,XYλZT ROI掃描、矩形裁剪,直線 | |
針孔 | 電動(dòng)單針孔,針孔直徑φ50-800μm,步進(jìn)1μm | ||
視場(chǎng)數(shù)(FN) | 18 | ||
二向色鏡轉(zhuǎn)輪 | 8孔位(包含高性能DM和10/90反射鏡) | ||
掃描器選配單元 | 激光功率監(jiān)控器,可選激光接口 | ||
高靈敏度光譜檢測(cè)器 | 檢測(cè)器模塊 | 半導(dǎo)體制冷型磷砷化鎵(GaAsP)光電倍增管,2通道 | |
光譜分光方式 | 電動(dòng)體相位全息(VPH)透射光柵,電動(dòng)可調(diào)狹縫, 可調(diào)節(jié)波長(zhǎng)帶寬:1-100nm,光譜檢測(cè)精度:2nm,步進(jìn)調(diào)節(jié)精度:1nm | ||
二向色鏡轉(zhuǎn)輪 | 8孔位(包含高性能DM和反射鏡) | ||
光譜檢測(cè)器 | 檢測(cè)器模塊 | 多堿光電倍增管,2通道 | |
光譜分光方式 | 電動(dòng)體相位全息(VPH)透射光柵,電動(dòng)可調(diào)狹縫, 可調(diào)節(jié)波長(zhǎng)帶寬:1-100nm,光譜檢測(cè)精度:2nm,步進(jìn)調(diào)節(jié)精度:1nm | ||
二向色鏡轉(zhuǎn)輪 | 8孔位(包含高性能DM和反射鏡) | ||
系統(tǒng)控制 | 控制單元 | 操作系統(tǒng): Windows7 專業(yè)版64位(英文版),Windows 10 專業(yè)版64位; 內(nèi)置用于實(shí)現(xiàn)精確成像時(shí)序的專用I/F電路板和硬件時(shí)序器 | |
顯示 | 30或32英寸顯示器(WQUXGA 2560×1600) | ||
熒光照明單元 | 外置熒光照明光源,通過(guò)光纖連接至掃描單元,共聚焦(LSM)光路和熒光觀察光路電動(dòng)切換 | ||
透射光檢測(cè)單元 | 外置透射光光電倍增管檢測(cè)器和LED光源,電動(dòng)切換 |
顯微鏡 |
倒置機(jī)架 | 正置機(jī)架(用于成像) | 正置機(jī)架(用于電生理) | |
---|---|---|---|
顯微鏡機(jī)架 | 電動(dòng)倒置顯微鏡 IX83 (IX83P2ZF) | 電動(dòng)固定載物臺(tái)正置顯微鏡 BX63L | 電動(dòng)固定載物臺(tái)正置顯微鏡 BX63L |
物鏡轉(zhuǎn)盤 | 電動(dòng)六孔位物鏡轉(zhuǎn)盤 | 電動(dòng)七孔位物鏡轉(zhuǎn)盤 | 編碼型搖擺式物鏡轉(zhuǎn)換器 編碼型滑入式物鏡轉(zhuǎn)換器 |
鏡 | 電動(dòng)長(zhǎng)工作距離聚光鏡 | 電動(dòng)聚光鏡 | 手動(dòng)長(zhǎng)工作距離聚光鏡 |
聚焦行程 | 內(nèi)置電動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)盤聚焦 行程:最小增量:10nm |
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