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上海金穗生物科技有限公司

親和細(xì)胞化學(xué)和級(jí)聯(lián)抗體信號(hào)放大技術(shù)

時(shí)間：2012-9-2閱讀：1829
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 （一）親和細(xì)胞化學(xué)方法斷

 
    該方法的基本原理見本書第五章“親和免疫組織化學(xué)技術(shù)”。將各種可標(biāo)記的熒光染料標(biāo)記在*或鏈霉親和素（streptavidin）上，通過*化二抗與特異性一抗結(jié)合，鏈霉親和素—熒光染料再與二抗上的*結(jié)合，使更多的熒光染料結(jié)合到抗原抗體部位，此時(shí)如熒光信號(hào)不夠強(qiáng)，還可用*化熒光染料與未飽和的鏈霉親和素結(jié)合，使信號(hào)得到進(jìn)一步放大。
 
    如果還想對(duì)信號(hào)作進(jìn)一步放大，可用抗熒光素的標(biāo)記熒光二抗，或用*標(biāo)記抗親和素二抗，然后再用熒光素標(biāo)記鏈霉親和素，其原始信號(hào)能更進(jìn)一放大。
 
    （二）級(jí)聯(lián)抗體放大法
 
    級(jí)聯(lián)抗體放大法是利用現(xiàn)有的抗熒光素、抗第二抗體和抗半抗原（*、地高辛等）抗體對(duì)信號(hào)進(jìn)行放大。例如間接法免疫熒光染色（FITC）后，可用抗FITC標(biāo)記熒光素與FITC結(jié)合，也可用抗FITC標(biāo)記AKP使其改變顏色，還可以用抗標(biāo)記有熒光素的二抗與間接法上二抗結(jié)合，使信號(hào)進(jìn)一步放大。
 
    放大信號(hào)的步驟越多，其敏感性肯定越高，但其特異性可能會(huì)得不到有效保證。目前上述試劑均有商品化供應(yīng)，只有合理使用，級(jí)聯(lián)放大作用才能發(fā)揮zui大效果，使非特異性染色降低到zui低。

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