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聚丙烯酰胺作用是什么|聚丙烯酰胺凝膠上好可銷品質

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產品簡介

聚丙烯酰胺凝膠獨選錦豪廠家，聚丙烯酰胺凝膠電泳作用：用于分離蛋白質和寡核苷酸。
作用原理聚丙烯酰胺凝膠為網狀結構，具有分子篩效應。

詳細介紹

聚丙烯酰胺凝膠獨選錦豪廠家，聚丙烯酰胺凝膠電泳作用：用于分離蛋白質和寡核苷酸。
作用原理聚丙烯酰胺凝膠為網狀結構，具有分子篩效應。它有兩種形式：非變性聚丙烯酰胺凝膠及SDS-聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）；非變性聚丙烯酰胺凝膠，在電泳的過程中，蛋白質能夠保持完整狀態(tài)，并依據(jù)蛋白質的分子量大小、蛋白質的形狀及其所附帶的電荷量而逐漸呈梯度分開。　　而SDS-PAGE僅根據(jù)蛋白質亞基分子量的不同就可以分開蛋白質。該技術zui初由shapiro于1967年建立，他們發(fā)現(xiàn)在樣品介質和丙烯酰胺凝膠中加入離子去污劑和強還原劑后，蛋白質亞基的電泳遷移率主要取決于亞基分子量的大小（可以忽略電荷因素）。　　SDS是陰離子去污劑，作為變性劑和助溶試劑，它能斷裂分子內和分子間的氫鍵，使分子去折疊，破壞蛋白分子的二、三級結構。而強還原劑如巰基乙醇，二硫蘇糖醇能使半*殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和SDS后，分子被解聚成多肽鏈，解聚后的氨基酸側鏈和SDS結合成蛋白- SDS膠束，所帶的負電荷大大超過了蛋白原有的電荷量，這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結構差異。　　SDS-PAGE一般采用的是不連續(xù)緩沖系統(tǒng)，與連續(xù)緩沖系統(tǒng)相比，能夠有較高的分辨率。　　濃縮膠的作用是有堆積作用，凝膠濃度較小，孔徑較大，把較稀的樣品加在濃縮膠上，經過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至一個狹窄的區(qū)帶。當樣品液和濃縮膠選TRIS/HCL緩沖液，電極液選TRIS/*。電泳開始后，HCL解離成氯離子，*解離出少量的*根離子。蛋白質帶負電荷，因此一起向正極移動，其中氯離子zui快，*根離子zui慢，蛋白居中。電泳開始時氯離子泳動率zui大，超過蛋白，因此在后面形成低電導區(qū)，而電場強度與低電導區(qū)成反比，因而產生較高的電場強度，使蛋白和*根離子迅速移動，形成以穩(wěn)定的界面，使蛋白聚集在移動界面附近，濃縮成一中間層。　　此鑒定方法中，蛋白質的遷移率主要取決于它的相對分子質量，而與所帶電荷和分子形狀無關。
    聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱為PAGE（Polyacrylamide gel electrophoresis）聚丙烯酰氨凝膠電泳
，是以聚丙烯酰胺凝膠作為支持介質的一種常用電泳技術。聚丙烯酰胺凝膠由單體丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成，聚合過程由自由基催化完成。催化聚合的常用方法有兩種：化學聚合法和光聚合法?；瘜W聚合以過硫酸銨（AP）為催化劑，以四甲基乙二胺（TEMED）為加速劑。在聚合過程中，TEMED催化過硫酸銨產生自由基，后者引發(fā)丙烯酰胺單體聚合，同時甲叉雙丙烯酰胺與丙烯酰胺鏈間產生甲叉鍵交聯(lián)，從而形成三維網狀結構。
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