羊抗-RBITC抗體*,羊抗-RBITC抗體用于免疫組化實(shí)驗(yàn)，WB實(shí)驗(yàn)，相應(yīng)的標(biāo)記抗體有HRP標(biāo)記抗體，F(xiàn)ITC標(biāo)記，BIO等。

【貯存條件】： 貯存于-20℃. 本品應(yīng)在低溫下保存，長(zhǎng)時(shí)間在暴露在空氣中，含量會(huì)有所降低。

規(guī)格：0.5ml/ml

材料和方法

　　. 材料 人成骨肉瘤MG63細(xì)胞為本實(shí)驗(yàn)室保存。重組質(zhì)粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈(zèng)。脂質(zhì)體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養(yǎng)基(美國(guó)Gibco 公司)，胎牛血清(Hyclone公司)，和EDTA(Sigma 公司)。A2387，KN93，CaM，重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain，Calbiochem)?？贵w：Myc (9E0;Roche)，HA (3F0;Roche)，Pcofilin，Cofilin(Santa Cruz)， CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.)，PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

　　.2 蛋白印跡實(shí)驗(yàn) MG63細(xì)胞鋪于35 mmol/L培養(yǎng)皿中，待細(xì)胞密度達(dá)到60%～70%時(shí)，轉(zhuǎn)染MycSSHL，48 h后換無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h，分別加入濃度為0.5，，2.5，5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細(xì)胞，離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min，上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

　　.3 體外激酶測(cè)定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉(zhuǎn)染至MG63細(xì)胞，48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對(duì)照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨(dú)或同時(shí)加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應(yīng)緩沖液中，30℃反應(yīng)40 min。反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜，應(yīng)用放射自顯影技術(shù)檢測(cè)32P 標(biāo)記的SSHL水平。

　　.4 體外SSHL磷酸酶活性測(cè)定實(shí)驗(yàn) MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉(zhuǎn)染至MG63細(xì)胞，48 h后，采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體，對(duì)照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL，加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨(dú)或同時(shí)加入抑制劑KN93)，20 μg/ml CaM，以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應(yīng)緩沖液(50 mol/L HEPES，pH 7.4，0. mol/L CaCl2，0.5 mol/L EDTA，3 mol/L MgCl2，00 mmol/L NaCl， mol/L dithiothreitol，0.5 mg/ml BSA， μg/ml leupeptin),中30℃反應(yīng)2 h。反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行SDSPAGE電泳、轉(zhuǎn)膜、雜交(一抗分別為Pcofilin，Cofilin， cmyc 抗體)、ECL顯色。

本公司更多產(chǎn)品優(yōu)惠:

大鼠大內(nèi)皮素Big ET抗體    66    鼠抗人CD68（巨噬細(xì)胞）單克隆抗體    CD68       4-3-3蛋白抗體(植物)
大鼠大內(nèi)皮素Big ET抗體    67    鼠抗人CD68,巨噬細(xì)胞單克隆抗體    CD68,Mavrophage KP        2，4-二氯苯氧乙酸 /除草劑/激素型除草劑抗體
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白MCP-/CCL2/MCAF抗體    68    鼠抗人CD68,巨噬細(xì)胞單克隆抗體    CD68,Mavrophage PG-M       2，4-二氯苯氧乙酸 /除草劑/激素型除草劑單克隆抗體
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2MCP-2/CCL8抗體    69    鼠抗人CD7單克隆抗體    CD7       5-羥色胺抗體
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3MCP-3/CCL7抗體    70    鼠抗人CD74單克隆抗體    CD74       5-羥色胺受體A抗體
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4MCP-4/CCL3抗體     7    鼠抗人CD74 B細(xì)胞單克隆抗體    CD74B細(xì)胞        5-羥色胺受體B(5-HT/serotonin RB)抗體
大鼠CH抗體    72    鼠抗人CD79acy單克隆抗體    CD79a cy,B Cell     5-羥色胺受體2B(5-HT/serotonin R2B)抗體
大鼠酯轉(zhuǎn)移蛋白CETP抗體    73    鼠抗人CD79a,單克隆抗體    CD79a,B Cell        5-羥色胺受體2A抗體
大鼠膽囊收縮素/腸促肽CCK抗體    74    鼠抗人CD79a單克隆抗體    CD79a/mb-       5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體