西班牙雅雷薩INGENASA非洲豬瘟抗原檢測(cè)ELISA試劑盒
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11.PPA.K.2 INGEZIM PPA DAS
試劑盒原理說(shuō)明
本試劑盒利用雙抗體夾心法:將非洲豬瘟抗體預(yù)包被于聚苯乙烯微孔板上,加入待檢樣品后,樣品中所有抗原將與其單抗結(jié)合。除去非特異性物后,加入酶標(biāo)記抗體和底物顯色。吸光值與酶標(biāo)記物的含量成正相關(guān),從而檢測(cè)樣品中非洲豬瘟的抗原水平。本試劑盒具有高特異性和準(zhǔn)確性的特點(diǎn)。
試劑盒組成
1 預(yù)包被板-Anti IgG(microtitration plates anti IgG) 1P
2 陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品(Positive control vials) 0.5ml
3 陰性標(biāo)準(zhǔn)品(Negative control vials) 0.5ml
4 100x酶標(biāo)記物(Vials with conjugate) 150μl
5 25x清洗液(washing solution) 125ml
6 稀釋液(Diluent DE010-01) 2*125ml
7 底物顯色液(TMB Substrate buffer) 65ml
9 底物(Substrate) 6.5ml
10 終止液(Stop solution) 65ml
操作程序
1 所有的試劑盒試劑(除了酶標(biāo)記物conjugate)在使用前須放置室溫平衡。
2 每個(gè)微孔中加入100μl的已經(jīng)1:100稀釋好的待檢樣品,同時(shí)加入標(biāo)準(zhǔn)陰性和標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性品100μl作為對(duì)照?;旌暇鶆?,蓋上蓋后37ºC溫箱避光孵育60min。在試驗(yàn)操作過(guò)程中應(yīng)小心、謹(jǐn)慎防止交叉污染。為了得到可靠的測(cè)定結(jié)果建議進(jìn)行雙孔重復(fù)測(cè)定。
3 從溫箱取出后,小心迅速地傾倒出反應(yīng)液后,用1x清洗液 300μl洗4次。
4 加入100 μl酶標(biāo)記物,蓋上蓋后37ºC避光溫箱孵育30min
5 從溫箱取出后,傾倒出反應(yīng)液后用1x清洗液 300μl/孔 洗4次。
6 加入100μl的底物(如樣品數(shù)量多,建議使用排槍滴加,確保反應(yīng)時(shí)間的相同),室溫避光孵育5min。
7 在每孔中迅速加入終止液100 μl。
8 使用ELISA酶標(biāo)儀讀取450nm下的吸光度值(OD值)。