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霉菌毒素酶聯(lián)免疫分析ELISA試劑盒使用說明書

時間:2013/7/15閱讀:287
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 本試劑盒僅供研究使用。
1 使用目的:
本試劑盒用于肉類組織(如雞、牛肉和豬肉)中霉菌毒素殘留的定量檢測。
2 實驗原理
本試劑盒采用競爭ELISA方法,在微孔板包被有霉菌毒素偶聯(lián)抗原,加入霉菌毒素標準品或樣品,游離霉菌毒素與微孔條上預(yù)包被的霉菌毒素偶聯(lián)抗原互相競爭抗霉菌毒素抗體酶標記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色,用酶標儀在450nm波長下進行檢測,吸光值與樣品中霉菌毒素含量成反比,通過標準曲線計算樣品中霉菌毒素的含量。
3 試劑盒組成
3.1 預(yù)包被的霉菌毒素偶聯(lián)抗原的可拆酶標板:1塊(12孔×8條)。
3.2霉菌毒素標準品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是: 0 ppb,0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7 ppb,8.1 ppb。
3.3抗霉菌毒素抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。
3.4顯色液A:1瓶(6ml)。
3.5顯色液B:1瓶(6ml)。
3.6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。
3.7*:1瓶(10×, 6ml),用于樣品稀釋用。
3.8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。
3.9說明書一份。

4 需要而未提供的材料
4.1 設(shè)備
4.1.1波長450nm酶標儀。
4.1.2粉碎機。
4.1.3量筒。
4.1.4振蕩器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman 或相當?shù)臑V紙。
4.1.7微量移液器。
4.2 試劑
4.2.1去離子水或蒸餾水。
4.2.2 甲醇。
5 貯存
5.1 試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍
5.2 未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存
6 注意事項
6.1 使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。
6.2 不要使用過期試劑盒。
6.3 試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。
6.4 標準品中含有霉菌毒素,使用時應(yīng)特別注意,操作時應(yīng)帶手套。
6.5 終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6.6 不同標準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結(jié)果。
6.7 不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實驗結(jié)果。
6.8 稀釋樣本時必須用本試劑盒中的*,否則會影響實驗結(jié)果
6.9 混合試劑時應(yīng)避免起泡。
7 工作液準備
7.1 霉菌毒素標準品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb
7.2 濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用
7.3 *:用蒸餾水按1:10(1+9)稀釋備用
7.3 顯色劑:已備用,避免光線直照
7.4 反應(yīng)終止液:已備用
8 樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準確,樣品應(yīng)當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
8.1取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
8.2強力振蕩3分鐘
8.3用Whatman 濾紙過濾
8.4取25µl處理后的樣品,加入25µl*于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)

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