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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)方法

2011年07月26日 15:01:32人氣:3621來源:上海勁馬實(shí)驗設(shè)備有限公司

上海勁馬實(shí)驗設(shè)備有限公司

:何

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細(xì)胞英文名稱   MEF  細(xì)胞中文名   小鼠胚胎成纖維細(xì)胞
形態(tài)特性       成纖維細(xì)胞樣   生長特性    貼壁生長 
特征特性     取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養(yǎng)建立。該細(xì)胞可用作飼養(yǎng)層細(xì)胞,支持胚胎干細(xì)胞ES的生長并維持ES未分化的狀態(tài)。當(dāng)作為飼養(yǎng)層細(xì)胞時,MEF需經(jīng)絲裂霉素C處理停止生長。建議作為ES細(xì)胞的飼養(yǎng)層時,MEF不要超過6代。
培養(yǎng)基   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 
血清   10%CS   其它因子   無

傳代方法
細(xì)胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個細(xì)胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。   P1
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS   支原體檢測   陰性 
同工酶      染色體    
使用權(quán)限   A類  實(shí)物狀態(tài)   可用

 

關(guān)鍵詞:顯微鏡
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