赭曲霉毒素A純化和富集_親和色譜柱
關(guān)于 赭曲霉毒素A親和色譜柱 的詳細(xì)介紹
赭曲霉毒素A純化和富集_親和色譜柱用途
此免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的赭曲霉毒素A,從而對赭曲霉毒素A樣品起到特異性純化和富集的作用。樣品過柱后的洗脫液既可結(jié)合ELISA測試盒或膠體金試紙條進(jìn)行檢測,也可聯(lián)合液相色譜進(jìn)行精確定量。親和色譜柱的使用可以改善信噪比,可提高檢測方法的準(zhǔn)確度。
赭曲霉毒素 A
赭曲霉毒素 A( Ochratox in A, OTA) 是由曲霉屬和青霉屬的某些菌種產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物, 是一種具有強(qiáng)腎臟毒和肝臟毒的真菌毒素,并有致畸、致突變和致癌作用。OTA廣泛存在于各種食物中,可污染糧食谷物、蔬果、調(diào)味料、咖啡、啤酒、葡萄酒及干果等多種農(nóng)作物和食品,嚴(yán)重危害人體健康。
富集原理
親和柱富集的原理是抗原抗體反應(yīng)。樣品經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后緩慢的通過赭曲霉毒素A免疫親和柱,樣品中的赭曲霉毒素A與偶聯(lián)在瓊脂糖珠上的抗體結(jié)合,洗滌掉雜質(zhì)后,根據(jù)檢測需要選用洗脫液洗脫,收集的洗脫液可以用于儀器分析,或是免疫學(xué)檢測方法檢測。
赭曲霉毒素A純化和富集_親和色譜柱產(chǎn)品包裝組成
1 赭曲霉毒素A免疫親和色譜柱 10支
2 10ml注射器 1支
3 說明書 1份
5 洗脫液A(供儀器分析用) 10 mL
6 洗脫液B(供ELSIA/膠體金檢測用) 10 mL
7 10×PBS 50 mL
8 10×PBST 5 ml
9 飽和Tris-base溶液 5 mL
注意事項(xiàng)
1 親和柱在不使用時(shí),需放置在于2~8℃保存,并確保在有效期之前使用。
2 柱子的填料應(yīng)保持濕潤,在保存、清洗、上樣、洗脫的過程中不能出現(xiàn)填料干燥的情況。
3在操作中,每次需使親和柱內(nèi)上一步的液體全部滴凈方能進(jìn)入下一步操作,填料里不應(yīng)有氣泡
4 標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中都可能含有毒素污染,在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)當(dāng)自始至終穿戴橡膠手套、實(shí)驗(yàn)服。
5 實(shí)驗(yàn)完后需對所用材料、容器、設(shè)備做適當(dāng)處理。
樣品處理
稱取試樣50g(精確到1mg)于均質(zhì)器的攪拌杯中,加入5.0g氯化鈉和100.0ml的提取液(乙腈:水=60:40)。將攪拌杯裝于均質(zhì)器上,于22000r/min高速攪拌提取3min。提取液經(jīng)槽紋折疊濾紙過濾于干凈的燒杯中。準(zhǔn)確移取10.0ml濾液于50ml容量瓶中,加磷酸緩沖液稀釋至刻度,混合均勻,經(jīng)玻璃纖維濾紙過濾,收集濾液,用飽和tris-bsae調(diào)節(jié)PH=7.0±0.5,待凈化。
赭曲霉毒素A純化和富集_親和色譜柱操作程序
1 自冰箱取出免疫親和柱,在室溫(22~25℃)平衡10 min,將上方塞和下方塞子取出。上方接上已經(jīng)去掉活塞的注射器。
2 清洗1:將親和柱固定好,往注射器內(nèi)依次加入1 mL PBST、2 mL PBS、200 μL 洗脫液(A或B)、1 mL PBST、大約5mL PBS;每次加完清洗液后套上注射器活塞以控制流速為1滴/2s,滴凈后再加入下一個(gè)清洗液;zui后流出的PBS的 PH應(yīng)為7±0.5,若尚未達(dá)此PH值,適當(dāng)增加PBS量來清洗。
3上樣:準(zhǔn)確量取5.0 mL處理后的樣品液于注射器,控制流速為1滴/3~5 s,棄去流出液。
4 清洗2: 待樣品滴凈后,依次加入2 mL PBST、2 mL PBS清洗。洗法同清洗1。
7 去掉注射器,根據(jù)后續(xù)檢測需要,加入0.2 mL洗脫液A或B,洗脫液自然滴下,用2 mL的離心管接收洗脫液,接洗脫液時(shí),流出*滴洗脫液不要。
8 將收集到的洗脫液轉(zhuǎn)入儀器分析或采用ELISA/膠體金檢測。(用作ELISA/膠體金的收集液用飽和Tris-base調(diào)節(jié)PH=7.0±0.5)
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USP編號:1436006 產(chǎn)品詳細(xì):Methylprednisolone Acetate (200 mg) 現(xiàn)行批號:R017K0 現(xiàn)有效使用日期:I0F082 (31-MAR-2016) CAS:53-36-1
USP編號:1437009 產(chǎn)品詳細(xì):Methylprednisolone Hemisuccinate (250 mg) 現(xiàn)行批號:R052J0 現(xiàn)有效使用日期:J0L519 (31-DEC-2017) CAS:2921-57-5
USP編號:1437053 產(chǎn)品詳細(xì):2-Methyl-1-propanol (1.2 mL/ampule; 3 ampules) 現(xiàn)行批號:R019D0 現(xiàn)有效使用日期:F0E212 (31-MAR-2017) CAS:78-83-1
USP編號:1437202 產(chǎn)品詳細(xì):Methylpyrrolidone (2 g) 現(xiàn)行批號:F0I296 現(xiàn)有效使用日期: CAS:872-50-4
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USP編號:1437450 產(chǎn)品詳細(xì):Methyl Salicylate (2 mL) 現(xiàn)行批號:R035R0 現(xiàn)有效使用日期:G1L203 (31-MAY-2017) CAS:119-36-8
USP編號:1437461 產(chǎn)品詳細(xì):Methyl Salicylate Related Compound A (50 mg) (Dimethyl 4-hydroxyisophthalate) 現(xiàn)行批號:F020X0 現(xiàn)有效使用日期: CAS:5985-24-0
USP編號:1437508 產(chǎn)品詳細(xì):Methyl Stearate (300 mg) 現(xiàn)行批號:H0K288 現(xiàn)有效使用日期:G0E290 (31-DEC-2013) CAS:112-61-8
USP編號:1437600 產(chǎn)品詳細(xì):Methylsulfonylmethane (200 mg) 現(xiàn)行批號:F0F298 現(xiàn)有效使用日期: CAS:67-71-0
USP編號:1437701 產(chǎn)品詳細(xì):Terbinafine Related Compound D (25 mg) ((2E)-N,6,6-trimethyl-N-[(4-methylnaphthalen-1-yl)methyl]-hept-2-en-4-yn-1-amine hydrochloride) 現(xiàn)行批號:F0L197 現(xiàn)有效使用日期: CAS:877265-33-3
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QY-RM0925 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體ELISA試劑盒 human MCV ELISA Kit
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氯離子(Cl)含量檢測試劑盒 K530-100
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乙醇脫氫酶活性檢測試劑盒 K787-100
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BCA蛋白定量試劑盒 K812-1000