操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:真菌膜蛋白提取試劑盒-大型真菌/蕈菌
英文名稱:Fungal membrane protein extraction kit
產(chǎn)品規(guī)格:50T|100T
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0165336
生物醫(yī)學(xué)實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點,本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
跨膜蛋白承擔(dān)各種生物功能,在疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質(zhì)譜分析等應(yīng)用配套,因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結(jié)構(gòu),因而妨礙了膜蛋白的功能研究。 真菌膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學(xué)而非去污劑方法的高產(chǎn)膜蛋白提取試劑盒。真菌膜蛋白提取試劑盒可以從各種大型真菌(蕈菌)中提取膜蛋白,可用于純化蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高質(zhì)量的蛋白提供了保證。該試劑盒提取的蛋白具有天然活性,可用于各種下游實驗。 儲存條件:蛋白酶抑制劑-20℃保存;蛋白提取液2-8℃保存。 有效期:一年。 注意事項: ●本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。 ● 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。 ● 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。 ● 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。 ● 避免皮膚或粘膜與試劑接觸。 產(chǎn)品特點: 1.使用方便。 2.將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 3.含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。 4.紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 5.蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。 該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲蛋白酶、半胱酸蛋白酶、天冬蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。 試劑盒以外自備試劑和儀器: ● 移液器、吸頭●離心機(jī)及離心管● 渦旋振蕩器●冰箱,冰盒 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
細(xì)菌NAD依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒
真菌/酵母NAD依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒
植物NAD依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒
細(xì)胞NADP依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NADP-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒
組織NADP依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NADP-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)elisa ,英文名: AQP-2 ELISA Kit
小鼠壞死因子β(TNF-β)ELISA檢測試劑盒MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 96T/48T
人庚型肝炎病毒(HGV)抗原免疫試劑盒 Human hepatitis G virus (HGV) aigen ELISA kit
RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)elisa規(guī)格:96T/48T
B5固著液50毫升
MouseIgGelisa小鼠IgGelisa規(guī)格:96T/48T
真菌膜蛋白提取試劑盒-大型真菌/蕈菌小鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa檢測試劑盒
小鼠胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)elisa分析檢測試劑盒
小鼠半乳糖凝集素9(GAL9)elisa檢測試劑盒
小鼠半乳糖凝集素7(GAL7)elisa檢測試劑盒
小鼠半乳糖凝集素3(Galectin-3)elisa檢測試劑盒
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。