實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發(fā)生反應的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質(zhì)要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
超氧化物歧化酶（SOD）測試盒(NBT法)微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6399 |
商品介紹：
測定意義: SOD（EC 1.15.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用，生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是H2O2主要生成酶，在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。 測定原理： 通過及氧化酶反應系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-.)，O2-.可還原氮藍四唑生成藍色甲臜，后者在560nm處有吸收；SOD可清除O2-.，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明SOD活性愈低，反之活性越高。 需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
50T 破傷風桿菌PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
10 mg DiO（細胞膜綠色熒光探針） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
250mL Borate Buffer（硼酸鹽緩沖液），0.5M,pH9.0 Borate Buffer，0.5M,pH9.0 常溫保存
1次 96孔板PCR片段純化回收試劑盒（離心法） 96 Microwell Plate PCR Clean-Up Kit 常溫
2 ug pGL5luci pGL5luci 低溫運輸，-20℃保存
麥康凱肉湯 MaConkey Broth 250g
1瓶 HeLa 229細胞株 HeLa 229 低溫運輸和保存
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-萬 Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin 10ml*20支/包
10000U 核糖核酸RNase If RNase If -20℃保存
100mL RNase-Free Sodium Acetate Solution（無RNase的乙酸鈉溶液）,1M，pH4.5 RNase-Free Sodium Acetate Solution,1M，pH4.5 常溫保存
1 管 EHA103農(nóng)桿菌 EHA103 Agrobacterium Strain -80℃保存
超氧化物歧化酶（SOD）測試盒(NBT法)微量法ADAM17/CD156b 瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換 0.1ml
Goat Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
DENND2D MAP激激活死亡域蛋白2D抗體 規(guī)格: 0.2ml
MAGEG1/HCA4/NDNL2 黑色素瘤相關抗原G1抗體（肝相關蛋白4） 規(guī)格: 0.2ml
HIF 2α 缺氧誘導因子2α 抗體HIF-2α 規(guī)格: 0.1ml
Cullin 1 Cullin1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受體酪激c-Abl抗體 0.1ml
IFI78/MX1 干擾素誘導蛋白P78抗體 規(guī)格: 0.1ml
SLK/Fyn 酪蛋白激Fyn（同步原基因）抗體 規(guī)格: 0.2ml
CASPR/Neurexin4 軸突蛋白4/少突膠質(zhì)細胞抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/APC APC標記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
PTN/Pleiotrophin 多效生因子抗體 規(guī)格: 0.1ml
