膜性腎?。?/span>MN）是人類(lèi)腎病綜合征常見(jiàn)的病因之一。膜性腎病以腎炎和腎功能衰竭為特征，包括腎小球基底膜（GBM）免疫復(fù)合物聚集引起的蛋白尿。 Chen,etal.等研究用陽(yáng)離子牛血清白蛋白（cBSA）免疫小鼠，通過(guò)小鼠腎臟沉積cBSA-IgG免疫復(fù)合物誘導(dǎo)膜性腎病,這種腎病稱(chēng)為免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）。
Chondrex公司提供陽(yáng)離子牛血清白蛋白（cBSA）和*弗氏佐劑用于誘導(dǎo)小鼠免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）。同時(shí)提供小鼠白蛋白檢測(cè)試劑盒用于評(píng)估
免疫復(fù)合物腎小球腎炎發(fā)展進(jìn)程。具體造模流程參照“小鼠免疫復(fù)合物腎小球腎炎造模方案”。
Chonrex提供以以下試劑用于免疫復(fù)合物腎小球腎炎模型制備和評(píng)估。
貨號(hào) | 中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 規(guī)格 |
9058 | 陽(yáng)離子牛血清白蛋白 | Cationic Bovine Serum Albumin (cBSA) | 20mg |
7008 | *弗氏佐劑 | Complete Freund's Adjuvant，1mg/ml | 5ml |
3012 | 小鼠白蛋白檢測(cè)試劑盒 | Mouse Albumin Detection Kit | 1Kit |
小鼠免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）造模流程
免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）模型可以通過(guò)誘導(dǎo)Balb/c或ICR小鼠，但是C57BL/6小鼠不能誘導(dǎo)產(chǎn)生該模型。
操作流程：
1. CBSA 和弗氏*佐劑制備乳劑，尾根部免疫100ug.
2.等待2周。
3.每隔一天靜脈注射400ug cBSA（一共免疫5次）
4.收集16個(gè)小時(shí)內(nèi)小鼠尿樣
5.測(cè)定尿樣中的尿蛋白
注：Balb/c可能會(huì)發(fā)生過(guò)敏性休克。這種情況，第14天免疫50ug cBSA就可以，16-22天繼續(xù)免疫400ug。
圖1.用Balb/c小鼠誘導(dǎo)ICGN模型
2. ICGN模型病程監(jiān)測(cè)
為了監(jiān)測(cè)ICGN模型的嚴(yán)重性，Chondrex 公司推出了小鼠尿蛋白檢測(cè)試劑盒（cat#3012）。小鼠腎臟會(huì)滲漏血清成分如danhong素，導(dǎo)致用比濁法測(cè)定的尿蛋白水平偏高，因此尿蛋白并非評(píng)估腎炎嚴(yán)重程度的適宜標(biāo)志物。而當(dāng)腎臟功能開(kāi)始發(fā)生異常時(shí)，白蛋白是尿液中先出現(xiàn)的蛋白，因此，白蛋白是評(píng)估小鼠腎炎模型的更適宜標(biāo)志物。對(duì)于小鼠IGGN腎炎模型，如果一個(gè)采集了16小時(shí)尿液的樣本中總白蛋白量多于1mg，就可以認(rèn)為該小鼠患有腎炎。
值得注意的是，16小時(shí)尿液的樣本中，尿白蛋白水平可以達(dá)到50-200 mg，這種情況被認(rèn)為是嚴(yán)重腎炎。
3. 小鼠ICGN模型致病原理
人的膜性腎病是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙沉積而引起的。沉積的免疫復(fù)合物激活補(bǔ)體，導(dǎo)致基底膜變厚。對(duì)于小鼠ICGN模型，用cBSA反復(fù)免疫小鼠。帶正電荷的cBSA與帶負(fù)電荷的基底膜（GBM）結(jié)合。抗cBSA抗體（主要是IgG1）與cBSA產(chǎn)生的免疫復(fù)合物，導(dǎo)致人膜性腎病出現(xiàn)多種癥狀，如：基底膜增厚，低蛋白血癥和蛋白尿。這種發(fā)病機(jī)制，同樣適用在兒童膜性腎病。
4. 免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）背景介紹
腎小球腎炎是指一系列由免疫應(yīng)答介導(dǎo)的導(dǎo)致腎小球炎癥。膜性腎病和膜性腎小球腎炎是人類(lèi)腎病綜合征常見(jiàn)的病因。膜性腎病的特征是由免疫復(fù)合物沿著基底膜與內(nèi)皮細(xì)胞之間的間隙沉積，導(dǎo)致基底膜增厚激活補(bǔ)體。激活的炎癥級(jí)聯(lián)導(dǎo)致腎功能受損，包括蛋白尿和腎功能衰竭。
有研究報(bào)道用大鼠膜性腎病模型（Heymann腎炎），研究人膜性腎病，盡管Heymann腎炎覆蓋了人膜性腎炎的很多方面，但是使用大鼠作模型有很多缺點(diǎn)。小鼠膜性腎炎模型是研究膜性腎病發(fā)病機(jī)制和開(kāi)發(fā)靶向治療的重要研究工具。Wayne et al.等研究用cBSA可誘導(dǎo)兔膜性腎病癥狀。另外，已有研究用cBSA在狗、貓、兔等動(dòng)物成功誘導(dǎo)免疫復(fù)合物腎小球腎炎模型。Chen et al,將這一模型用于小鼠，稱(chēng)為：免疫復(fù)合物腎小球腎炎（IGGN）模型。
參考文獻(xiàn)：
1.Chen, J.S., et al., Mouse model of membranous nephropathy induced by cationic bovine serum albumin: antigen dose response relations and strain differences. Nephrol Dial Transplant 19(11):2721-8 (2004).
2.H. Debiec et al., Early-childhood membranous nephropathy due to cationic bovine serum albumin. N Engl J Med. 364, 2101–2110 (2011).
3.Yamamoto, T., et al., Bovine serum albumin (BSA) nephritis in rats. I. Experimental model. Acta Pathol Jpn 28(6): p. 859-66 (1978).
4.Bass, P.S., et al., The effect of cyclosporin A on cationized bovine serum albumin-induced nephropathy in NZW rabbits. J Pathol 167(1):41-7 (1992).
5.Wright, N.G., et al., Experimental immune complex glomerulonephritis in dogs receiving cationized bovine serum albumin. Res Vet Sci 38(3):322-8 (1985).
6.Nash, A.S., N.A. Mohammed, and N.G. Wright, Experimental immune complex glomerulonephritis and the nephrotic syndrome in cats immunised with cationised bovine serum albumin. Res Vet Sci 49(3):370-2 (1990).
