1、原理及適用范圍
菌落總數(shù)是指樣品經過處理,在一定條件下培養(yǎng)后所得1mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù),是的微生物檢測項目。菌落總數(shù)測試片(FilmplateTM Aerobic BB202)是一種預先制備好的一次性培養(yǎng)基產品,含有標準的營養(yǎng)培養(yǎng)基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在測試片上呈紅色,這樣可縮短計數(shù)時間和增強計數(shù)效果。本產品適合于各類食品及食品原料中菌落總數(shù)的測定,也可用于檢測食品加工容器、操作臺和其他設備表面的菌落總數(shù)。執(zhí)行標準:食品安全國家標準 食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定(GB 4789.2)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,必要時用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調節(jié)樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。
2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測。將菌落總數(shù)測試片(BB202)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養(yǎng):將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內,堆疊片數(shù)不超過12片。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h;水產品培養(yǎng)溫度為30℃±1℃,培養(yǎng)48h。
3、結果判讀
細菌在測試片上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數(shù)適中(30~300個)的測試片進行計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(或每克)樣品中所含的細菌菌落總數(shù)。
4、保存條件
本產品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,在拆封前將整包回溫至室溫。