小細(xì)胞肺癌細(xì)胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
小細(xì)胞肺癌細(xì)胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:天青II,天青A,蔚藍(lán)II,3-氨基-7-二甲基氨基吩噻嗪-5-鎓lv"化物,7-(二甲基)-3-亞胺基-3H-分噻嗪鹽suan",Azure II
天青I,天青B,亞甲天青,蔚藍(lán)I,亞甲基天青,氮雜脲I ,Azure B
天青II曙紅,Azure II eosin
橙黃G6,金橙G,桔黃G,橙黃GG,suan"性耐光桔黃,suan"性橙0,橙黃G鈉,-ben"基偶氮--萘酚-6,8-二磺suan"鈉,耐光橙G,橙黃G,7-羥基-8-(ben"基偶氮基)-,3-萘二磺suan"二鈉鹽,Orange G6
橙黃IV,四號(hào)橙,桔黃IV,suan"性黃D,suan"性四號(hào)橙,金蓮橙OO,金橙IV,二ben"胺黃,4-[[4-(ben"基氨基)ben"基]偶氮]ben"磺suan"單鈉鹽,二ben"胺偶氮對(duì)ben"磺suan"鈉,Orange IV
橙黃Ⅱ,suan"性橙II,金橙Ⅱ,suan"性金黃II,-萘酚偶氮對(duì)ben"磺suan"鈉,二號(hào)橙,桔黃Ⅱ,suan"性橙,β-萘酚橙,suan"性二號(hào)橙,suan"性橙7,4-(-羥基--萘偶氮)ben"磺suan"鈉鹽,金蓮橙OOO,β-萘酚偶氮對(duì)ben"磺suan"鈉,金黃粉,-萘酚偶氮對(duì)ben"磺suan"鈉,Orange Ⅱ
橙黃Ⅰ,金橙I,一號(hào)橙,suan"性橙I,4-羥基萘偶氮對(duì)ben"磺suan"鈉,-萘酚偶氮對(duì)ben"磺suan"鈉,4-[(4-羥基--萘基)偶氮基]ben"磺suan"單鈉鹽,桔黃I,Orange Ⅰ
金胺O,金絲雀黃O,鹽基淡黃,堿性黃,堿性嫩黃O,鹽基槐黃,堿性槐黃,4,4'-碳亞氨基雙(N,N-二甲基ben"胺)單鹽suan"鹽,堿性淡黃O,鹽suan"氨基四甲基二氨基ben"甲烷,金胺,金絲雀黃,奧黃,Auramine O