| 上海宇淳生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
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| 參考價(jià) | ￥580 |
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型號(hào)
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 96T | 580元 | 1 盒 可售 |
更新時(shí)間：2024-06-13 10:44:07瀏覽次數(shù)：210
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還原糖含量試劑盒,微板法
還原糖含量試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 還原糖含量試劑盒說明書 （貨號(hào)：WS2050W 微板法 96 樣） 一、產(chǎn)品簡介： 還原糖廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中。植物體內(nèi)的還原糖主要包括葡萄 糖、果糖和麥芽糖等，是最常見的單糖和雙糖。 在堿性條件下，DNS 試劑與還原糖共熱生成棕紅色氨基化合物，經(jīng)過 480nm 到 540nm 波長掃描發(fā)現(xiàn)在 500nm 有特征吸收峰；在一定的濃度范圍內(nèi)，還原糖含量與 500nm 吸光 度成線性關(guān)系，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可求出樣品中還原糖的量。 二、測試盒組成和配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 12mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉體 mg×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、乙醇、蒸餾水。 四、還原糖含量檢測： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： ① 組織樣本： 稱取 0.1g 樣本（若是干樣，如烘干煙葉等可取 0.05g；若是水分充足的樣本可取 0.2g）， 先加入 0.8mL 的 80%乙醇（自備：取 80mL 乙醇溶于 20mL 蒸餾水中），冰浴勻漿，倒入 有蓋離心管中，再用 80%乙醇沖洗研缽并轉(zhuǎn)移至同一 EP 管中，使 EP 管中粗提液終體積 定容為 1.5mL（若用自動(dòng)研磨機(jī)可直接加入 1.5mL 的 80%乙醇研磨）；置 50℃水浴 20min （封口膜纏緊，防止液體散失，且間隔 2min 振蕩混勻一次），冷卻后（若有損失，可加 80%乙醇補(bǔ)齊至 1.5mL），12000rpm，室溫離心 10min，取上清液備用。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取 ② 液體樣本： 澄清的液體樣本直接檢測，若渾濁則需 12000rpm，室溫離心 10min，取上清液備用。 2、上機(jī)檢測： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 500nm。 ② 調(diào)節(jié)水浴鍋至 95℃。 ③ 上清液稀釋：可先取 2 個(gè)樣本檢測，確定適合本批樣本的稀釋濃度 D：葉片類樣本可 稀釋 10 倍，含糖量高的果肉類樣本可稀釋 20 倍左右。 ④ 在 EP 管中加入下列試劑： 試劑（μL） 測定管 空白管（僅做一次） 樣本 100 蒸餾水 100 試劑一 100 100 混勻，在 95℃水浴中加熱 10min（蓋緊封口，防止水分散失）， 取出后立即過冷水冷卻至室溫。 蒸餾水 1000 1000 混勻，取 200μL 于 96 孔板中，500nm 讀取吸光值 A， ΔA=A 測定-A 空白。本試劑盒僅供科研使用 【注】：若ΔA 值大于 1，樣本可用蒸餾水再稀釋，稀釋倍數(shù) D 代入計(jì)算公式計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 1、 標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 y = 1.0026x-0.0324；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光值ΔA。 2、按樣本重量計(jì)算： 還原糖(mg/g 重量)=[(ΔA+0.0324)÷1.0026×V1]÷(W×V1÷V)×D=1.496×(ΔA+0.0324)÷W×D 3、按質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）計(jì)算： 還原糖(%重量)=[( ΔA+0.0324)÷1.0026×V1]÷(W×V1÷V)×10-3× =[0.1496×(ΔA+0.0324)÷W×D]% 4、按液體體積計(jì)算： 還原糖(mg/mL)=( ΔA+0.0324)÷1.0026×D=0.997×(ΔA+0.0324)×D V---樣品提取液總體積，1.5mL； V1---測定時(shí)所取樣本的體積，0.1mL； W---樣本質(zhì)量，g； D---自行稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（1mg/mL）：從標(biāo)準(zhǔn)品管中稱量取出 2mg 至一新 EP 管中，再加 2mL 蒸餾水混勻溶解即 1mg/mL 的葡萄糖（母液需在兩天內(nèi)用且-20℃保存）。 2 把母液用蒸餾水稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1. mg/mL。也可 根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 依據(jù)測定管的加樣表操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2
