念珠菌顯色培養(yǎng)基根據(jù)酶底物法,通過顯色來區(qū)別不同念珠菌,25-28℃培養(yǎng)48小時(shí)后,白色念球菌顯藍(lán)綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
念珠菌顯色培養(yǎng)基成份 (g/L)
營養(yǎng)物質(zhì)(蛋白胨等) | 30.0 |
色素 | 2.9 |
* | 0.1 |
瓊脂 | 15.0 |
pH 6.0 ± 0.2 25 ℃ |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。
注意
此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用。
用法
稱取本品9.6g(可按4.8g/100ml的比例擴(kuò)大或縮小),加入200ml蒸餾水或純化水中,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過1分鐘。將加熱后的培養(yǎng)基水浴冷卻至45-50℃,輕輕地?fù)u勻,傾入無菌平皿(9cm的15ml/皿,7cm的10ml/皿),瓊脂*凝固后,在36℃±1℃的培養(yǎng)箱中倒置放置0.5-1小時(shí),備用。
注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 37 ℃的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時(shí)。
貯存
制備好的平板應(yīng)立即使用,應(yīng)避免光線直接照射。干粉培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度2-8℃,注意避光保存。
失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟
1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液涂布或劃線接種于平板上;
3、25-28℃培養(yǎng)48h。白色念珠菌典型特征為藍(lán)綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。
4 、對可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上,25-28℃培養(yǎng)24-48小時(shí),挑取單菌落做鏡檢和生化試驗(yàn)。
質(zhì)量控制
1 、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動(dòng)性,呈乳白色。制備好的平板呈透明無色固體培養(yǎng)基。
2 、微生物試驗(yàn)
在25-30℃培養(yǎng)48小時(shí):
質(zhì)控菌株 | 生長情況 | 菌落顏色 |
白色念珠菌 | +++ | 藍(lán)綠色 |
熱帶念珠菌 | +++ | 藍(lán)灰色、鐵藍(lán)色 |
克柔氏假絲酵母菌 | +++ | 粉紅色 |
光滑念珠菌 | +++ | 紫色 |
其它念珠菌 | +++ | 白色 |
大腸桿菌 | - | - |
方法的局限性
本培養(yǎng)基鑒定白色念珠菌,少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽性或假陰性,需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。
典型特征
白色念珠菌典型特征為藍(lán)綠色,熱帶念珠菌顯藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑念珠菌顯紫色,克柔假絲酵母顯粉色,其它念珠菌顯白色,細(xì)菌被抑制。