考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測(cè)試盒-蛋白-含量系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測(cè)試盒-蛋白-含量系列
測(cè)定原理:
在酸性溶液中,考馬斯亮藍(lán)G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合形成藍(lán)色復(fù)合物;該復(fù)合物在620nm處有大吸收峰, 其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。該方法靈敏度高,適合微量蛋白質(zhì)分析。
自備儀器和用品:
離心機(jī)、分光光度計(jì)、石英比色皿、移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體30 mL×1瓶,4℃保存。
樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?br/>
1.液體樣品:澄清液體樣品可以直接測(cè)定。
2.組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:20的比例(建議稱(chēng)取約0.05 g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水))
冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測(cè)液。(動(dòng)物樣品常常需要稀釋?zhuān)?/p>
3.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。